人TOP2A单克隆抗体的制备与初步应用
汤璐含
褚伯阳
金坚
1.214122无锡,江南大学药学院分子设计与药理学实验室2.214122无锡,江南大学药学院分子设计与药理学实验室3.214122无锡,江南大学药学院分子设计与药理学实验室
摘要：目的制备抗TOP2A(DNA拓扑异构酶Ⅱ型α)单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定.方法应用分子生物学技术构建含人TOP2A编码序列的原核表达载体,表达并纯化人TOP2A蛋白.TOP2A蛋白皮下多点和腹腔注射加强免疫Balb/c小鼠,取脾与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,利用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,采用有限稀释法进行亚克隆,用免疫印迹法、免疫组化染色和流式细胞术对抗体进行特异性鉴定.结果获得了3株能够稳定分泌TOP2A单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1 1G5、3B10和10A3,通过免疫印迹、免疫组化和流式结果验证均为阳性.结论成功制备TOP2A单克隆抗体,为进一步的TOP2A蛋白的表达与肿瘤的关系研究奠定了基础.
关键词：TOP2A原核表达单克隆抗体
分类号：Q511(蛋白质)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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