甲型副伤寒沙门菌减毒株的构建与鉴定
熊坤1
陈志瑾1
李建华2
朱春岳3
丛延广1
饶贤才1
1.400038重庆,第三军医大学基础部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室2.400038重庆,第三军医大学学员旅16营3.400038重庆,第三军医大学学员旅4营
摘要：目的 构建甲型副伤寒沙门菌减毒株,测试其减毒效果,为制备减毒疫苗奠定基础.方法 利用同源重组技术敲除甲型副伤寒沙门菌CMCC50093株的ncD基因和aroC基因,构建出yncD单基因敲除株和ync D-aroC双基因敲除菌株;通过测定和比较野生株、ncD单基因敲除株及ync D-aroC双基因敲除株的生长曲线,评估基因敲除对细菌生长的影响;以猪胃黏蛋白增毒小鼠为模型,测定野生株和双基因敲除株对模型动物的半数致死量LD50,评价双基因敲除株的减毒效果.结果 成功构建并筛选到yncD单基因及nc D-aroC双基因敲除的甲型副伤寒沙门菌突变菌株.生长曲线测定显示ncD基因和aroC基因敲除后,敲除株生长明显缓慢.野生株和双基因敲除株针对模型小鼠的LD50分别为7.90×101和3.33×106 CFU,结果表明ync D-aroC双敲除菌株的毒力较野生株下降约42 202倍,具有显著的减毒效果.结论 本研究所构建的甲型副伤寒沙门菌nc D-aroC双基因敲除突变株毒力明显降低,安全性好,为研制甲型副伤寒减毒活疫苗奠定了坚实基础.
关键词：甲型副伤寒沙门菌减毒疫苗基因敲除同源重组
分类号：R378.2+4(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：重庆市科技攻关计划(cstc2012gg-yyjs10057)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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