体外扩增的Treg细胞抑制NK细胞介导的抗肿瘤免疫
高祥
郭涛
黄婧
刘钊
骆晨
罗诗樵
1.重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,4000162.重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,4000163.重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,4000164.重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,4000165.重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,4000166.重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,400016
摘要：目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)对NK细胞肿瘤杀伤力的影响及Treg细胞介导的抗肿瘤免疫抑制的机制;初步探讨过继输注NK细胞逆转Treg细胞介导的抗肿瘤免疫抑制的作用.方法 免疫磁珠分离法(MACS)分离得小鼠脾脏Treg细胞及NK细胞,用流式细胞术检测其纯度.以CD3/CD28单克隆抗体磁珠和重组小鼠 白介素2(rmIL-2)联合刺激体外扩增Treg细胞,重组小鼠白介素15(rmIL-15)、rmIL-2以及氢化可的松联合刺激体外扩增NK细胞.将扩增后Treg细胞及NK细胞按不同比例混合淋巴细胞培养,MTT比色法检测NK细胞的杀伤活性.将B16-F10小鼠黑色瘤细胞输注至Balb/c小鼠体内建立肺移植瘤模型[1],将荷瘤小鼠分为4组:A组单独接种B16-F10小鼠黑色瘤细胞;B组接种Treg细胞+B16-F10黑色素瘤细胞;C组接种B16-F10黑色素瘤细胞+NK细胞;D组接种Treg细胞+B16-F10黑色素瘤细胞+NK细胞.MTT比色法测定各实验组小鼠脾脏NK细胞的杀伤活性,并比较不同处理组小鼠肺部肿瘤结节数目.结果 体外扩增后的Treg细胞对新鲜分选及扩增后的NK细胞活性均具有明显抑制作用(P＜0.05),且抑制作用呈剂量依赖关系;A组荷瘤小鼠NK细胞活性低于正常小鼠,且B组荷瘤小鼠NK细胞活性较A组进一步降低(P＜0.05);D组荷瘤小鼠NK细胞活性高于A组和B组荷瘤小鼠,但仍低于正常小鼠组(P＜0.05).B组荷瘤小鼠肺部移植瘤数目(105.33±10.97)较A组明显增多(17±4.58) (P＜ 0.01);C组荷瘤小鼠肺部移植瘤数目(2.00±1.00)较A组(17±4.58)明显减少(P=0.037);D组荷瘤小鼠肺移植瘤数目(79.00±8.54)较B组明显降低(105.33±10.97)(P=-0.030),但仍高于A组荷瘤小鼠(17±4.58) (P＜ 0.001).结论 体内种植肿瘤会抑制机体NK细胞活性;输注体外扩增Treg细胞能够通过抑制NK细胞发挥抗肿瘤免疫抑制;过继输注体外扩增NK细胞能够部分逆转Treg细胞介导的抗肿瘤免疫抑制.
关键词：调节性T细胞自然杀伤细胞肿瘤免疫
分类号：R392.4(医学免疫学)R392.9(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(H1006/30972789)重庆市自然科学基金计划项目(cstc2013jcyjA10105)重庆市医学科技计划项目(2008-2-02)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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