重组人精囊蛋白1片段的原核表达及其对精子活率的影响
温彦1
白明星2
旷毓婵2
何畏1
刘威2
1.第三军医大学西南医院妇产科,重庆,4000382.第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038
摘要：目的 通过对人精囊蛋白1 (semenogelin I,SEMGI)第165～281位氨基酸序列片段(△SEMGI)的原核表达、纯化与鉴定,分析不同质量浓度下的该片段对精子活率影响.方法 通过PCR扩增△SEMGI片段目的基因,与pMAL-c2x-tev载体重组;重组质粒转化ROSETTAⅡ后IPTG诱导表达,目的蛋白经过Amylose层析柱、Ni柱、分子筛纯化、免疫印迹法和蛋白质谱分析鉴定.最终,在4个不同蛋白质量浓度下孵育并分析其对人精子活率的影响.结果 蛋白质谱分析证实△SEMGI蛋白片段重组成功,其在不同质量浓度下对精子活率均有抑制作用(P＜0.05).结论 重组精囊蛋白1的C端片段具有抑制精子活率功能,为进一步研究蛋白结构提供基础.
关键词：人精囊蛋白1片段原核表达蛋白纯化精子活率
分类号：R394(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(2012BAI31B07)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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