呼吸道合胞病毒的分离鉴定及其致病力的初步评价
朱萍1
谷宏婧2
谢正德3
周娅1
杨鹏辉4
王希良2
1.宁夏医科大学基础医学院病原生物学教研室,银川,7500042.军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,1000713.北京儿童医院病毒研究室,1000454.解放军第302医院肝胆外科,北京,100039
摘要：目的 分离鉴定临床呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),评价其致病力,为疫苗评价及致病机制的研究提供实验材料.方法 收集临床呼吸道感染重症患儿的鼻咽分泌物样本进行RT-PCR初步鉴定,通过病毒培养,空斑纯化,电镜观察及病毒滴度测定,筛选出1株呼吸道合胞病毒候选株,经全基因组测序后命名为BJ016.选用14日龄C57乳鼠,每组26只,采用BJ016为实验组,PBS为对照组,分别对小鼠滴鼻感染,30 μl/只.连续14日监测2组小鼠体质量变化及死亡率,肺组织的病毒载量、湿干比,HE染色观察肺病理变化并计数炎性细胞总量,同时采用CBA测定血清中细胞因子的变化.结果 100份临床呼吸道感染重症患儿鼻咽分泌物样本中,RT-PCR鉴定为RSV A亚型阳性共21例,经病毒分离培养、空斑纯化、电镜观察及RT-PCR鉴定后得到16株RSV临床分离株,通过TCID50测定病毒滴度筛选出1株滴度为1065 TCID50/ml的候选株,基因组序列分析显示其为NA1基因型,命名为BJ016.BJ016感染14日龄C57乳鼠后造成肺损伤,在第5日达到发病高峰时测定病载、湿干比、病理检测并计数炎性细胞,实验组较对照组具有明显统计学差异,血清中MCP-1、IL-6、G-CSF及MIP-1α均显著性升高.结论 成功分离出 1株能致死14日龄C57乳鼠的RSV病毒株并初步评价了其致病力,为疫苗评价及RSV致病机制的研究提供了良好的实验材料.
关键词：RSV病毒分离C57乳鼠致病力
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(SS2012AA020905)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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