抗多环芳烃单克隆抗体的制备及初步鉴定
许丽
赵鲁
张雪春
程言君
王洁
1.轻工业环境保护研究所,北京,1000892.轻工业环境保护研究所,北京,1000893.轻工业环境保护研究所,北京,1000894.轻工业环境保护研究所,北京,1000895.轻工业环境保护研究所,北京,100089
摘要：目的 本研究制备了2株抗多环芳烃单克隆抗体,并对其免疫学特性进行了初步鉴定.方法 以芘丁酸(PBA)为半抗原,采用活性酯法分别与BSA和OVA偶联合成免疫抗原和包被抗原,4次免疫Balb/c小鼠后,选择抗体效价1∶25 600的小鼠脾细胞与Sp2/0细胞采用PEG进行细胞融合.ELISA法筛选阳性细胞株,有限稀释法进行亚克隆,体内诱生腹水法制备单克隆抗体.抗体经Protein G亲和纯化后,SDS-PAGE检测抗体纯度,测定抗体水平和亚类.间接ELISA法测定抗体效价、亲和力常数;竞争ELISA法测定2株抗体特异性和交叉反应率.结果 PBA-BSA免疫成功,共获得2株可稳定分泌抗多环芳烃单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为#1 、#6-B7.2株单克隆抗体纯化后经鉴定为IgG1亚类,质量浓度分别为4.1和3.6 mg/ml,效价分别为1∶25 600和1∶51 200,亲和常数分别为7.52×108和1.25×109.结论 2株抗体均对高环PAHs具有较高的交叉反应率,而无法识别低环的PAHs.
关键词：多环芳烃单克隆抗体特性鉴定酶联免疫吸附法
分类号：R124(环境医学、环境卫生)R155.5(营养卫生、食品卫生)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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