鲤鱼TLR2过表达对下游干扰素相关免疫因子转录水平的影响
韦信贤1
贾鹏2
童桂香3
王津津2
郑晓聪2
何俊强2
杨先乐4
刘荭2
1.201306,上海海洋大学水产与生命学院;530021南宁,广西水产科学研究院2.深圳出入境检验检疫局,5180013.广西水产科学研究院,南宁,5300214.上海海洋大学水产与生命学院,201306
摘要：目的 探讨鲤鱼Toll样受体2(CcTLR2)过表达对下游干扰素相关免疫因子转录水平的影响及其介导的抗病毒效应.方法 构建过表达载体pEGFP-N 1-CcTLR2,并将pEGFP-N1-CcTLR2和空载体pEGFP-N1同时转染鲤鱼上皮瘤(epithelioma papulosum cyprinid,EPC)细胞;采用real-time PCR检测转染后0、6、12、24、48和72 h细胞内干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)和IRF7以及干扰素刺激基因ISG15、Mx1、PKR和Viperin的mRNA转录水平;并通过鲤春病毒血症病毒(spring viraemia of carp virus,SVCV)感染实验验证TLR2的抗病毒效应.结果 在EPC细胞中转染pEGFP-N1-CcTLR2后IRF3、IRF7、ISG15、Mx1、PKR和Viperin的mRNA转录水平均出现明显上调,在转染后48 h,其转录水平分别相当于转染前的6.3倍、16.5倍、15.0倍、13.0倍、7.6倍和92.4倍,差异显著(P＜0.01);与转染pEGFP-N1空载体相比,转染pEGFP-N 1-CcTLR2的EPC细胞IRF3、IRF7、ISG15、Mx1、PKR和Viperin的mRNA转录水平在转染后48 h和72 h分别上调2倍和2.2倍、1.5倍和2.4倍、3.9倍和4.7倍、3.4倍和6.7倍、5.4倍和3.7倍、6.6倍和15.6倍,差异显著(P＜0.01);转染pEGFP-N1组在感染SVCV后6、12、24、48和72 h的病毒量分别是转染pEGFP-N 1-CcTLR2组的1.1倍、2.4倍、3.8倍、11.7倍、11.4倍,差异显著(P＜0.01).结论 鲤鱼TLR2在EPC细胞中过表达可上调IRF3、IRF7、ISG15、Mx1、PKR和Viperin基因的mRNA转录水平,以及抑制SVCV的增殖;提示鱼类TLR2可通过激活IRF3或/和IRF7信号通路诱导Ⅰ-IFN的产生,进而诱导ISG15、Mx1、PKR和Viperin等干扰素刺激基因表达抗病毒蛋白发挥抗病毒免疫效应.
关键词：Toll样受体2过表达干扰素调节因子干扰素刺激基因转录水平
分类号：S91(水产基础科学)
资助基金：质检公益性行业科研专项(201210214)质检公益性行业科研专项(201210055)质检总局科研项目(2012IK032)质检总局科研项目(2013IK043)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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