let-7e对PBMCs和原代单核细胞产生IL-10的影响
桂连
黄俊琪
1.510080 广州,中山大学附属第一医院广东省器官捐献与移植免疫重点实验室;510080 广州,中山大学中山医学院免疫学研究所2.510080 广州,中山大学附属第一医院广东省器官捐献与移植免疫重点实验室;510080 广州,中山大学中山医学院免疫学研究所
摘要:目的 研究let-7e对PBMCs和原代单核细胞产生IL-10的影响.方法 生物信息学分析let-7e的靶基因并通过荧光素酶报告实验进行验证;用1 μg/ml或10 μg/ml LPS刺激PBMCs和原代单核细胞24、48和72 h后,ELISA法检测细胞培养上清中IL-10的质量浓度,筛选出LPS最佳刺激时间和质量浓度;用let-7e mimic或阴性对照(NC)瞬时转染PBMCs和原代单核细胞24、36和48 h后,qRT-PCR和免疫荧光法检测其转染效率;转染细胞经LPS刺激后,ELISA法检测细胞培养上清中IL-10的质量浓度.结果 let-7e可能直接靶向抑制IL-10;1(u)mlLPS刺激细胞24 h即可产生较高水平的IL-10;瞬转let-7e mimic 24 h即可使细胞高表达let-7e;let-7e mimic组细胞培养上清中IL-10的质量浓度低于let-7e NC组.结论 let-7e可抑制PBMCs和原代单核细胞产生IL-10.
关键词:let-7eIL-10LPS炎症
分类号:R373.33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
资助基金:国家自然科学基金(30872350)国家自然科学基金(31370870)广东省自然科学基金(S2012010009050)广东省自然科学基金(S2013020013000)广东省自然科学基金(S81510008901000017)广东省科技计划(2010B050700008)广东省科技计划(2011B040300022)广东省科技计划(2013A020229003)广州市科技计划(11C32060749)广州市科技计划(2011J4100084)广州市科技计划(2008Z1-E221)中山大学高等学校基本科研业务费专项青年培育项目(10ykpy31)广东省器官捐献与移植免疫重点实验室建设项目(2013A061401007)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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