鲍曼不动杆菌外膜蛋白A1S_1969的克隆表达及免疫保护机制初步研究
蔡昌芝
冯强
杨赟
魏振波
纪永军
牟道华
敬海明
邹全明
曾浩
1.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,4000382.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,4000383.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,4000384.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,4000385.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,4000386.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,4000387.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,4000388.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,4000389.第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆,400038
摘要：目的 制备鲍曼不动杆菌(Ab)A1S_1969重组蛋白,利用小鼠全身脓毒血症感染致死模型评价A1S_1969重组蛋白的免疫保护效果,探讨可能的免疫保护机制,为筛选Ab疫苗有效的保护性抗原奠定基础.方法 基于反向疫苗学技术筛选出Ab外膜蛋白A1S_1969,利用pGEX-6P-2质粒构建GST融合表达载体,重组表达的A1S_1969蛋白经亲和层析高效纯化后与铝佐剂吸附制备而成重组A1S_1969免疫原;采用Balb/c小鼠全身感染模型评价A1S_1969重组蛋白的免疫保护效果,通过ELISA检测免疫小鼠IgG抗体滴度和IgG抗体亚型.制备A1S_1969重组蛋白抗血清进行体外调理吞噬杀菌实验.结果 成功克隆、表达并纯化A1S 1969重组蛋白,纯度＞90％.动物免疫保护结果显示A1S_1969重组蛋白组小鼠存活率为55.6％,对照组小鼠存活率为20.0％(P＜0.05);末次免疫7d后小鼠体内总IgG抗体滴度为1:64 000,以IgG1亚型为主;体外调理吞噬杀菌实验结果显示A1S_1969特异性血清抗体可以增强中性粒细胞对Ab的杀菌作用,实验组杀菌率可达55％,对照组无杀菌活性.结论 A1S_1969重组蛋白可显著提高全身脓毒血症感染致死模型小鼠的存活率,具有良好的免疫保护效果.
关键词：鲍曼不动杆菌基因工程疫苗克隆表达重组蛋白免疫保护
分类号：R378.99(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家重大科技专项(2013ZX09J13107-03B)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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