Calcein-AM/PI双染法结合流式细胞术检测γδT细胞毒性的方法
饶秀茸
崔博婧
付凡
王宇环
马飞
1.深圳市合一康生物科技股份有限公司,5180002.深圳市合一康生物科技股份有限公司,5180003.深圳市合一康生物科技股份有限公司,5180004.深圳市合一康生物科技股份有限公司,5180005.深圳市合一康生物科技股份有限公司,518000
摘要：目的 建立和优化钙黄绿素-AM (Calcein-AM)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒活性的方法.方法 利用Calcein-AM标记靶细胞,然后与效应细胞共孵育24 h,结束后加入PI,最后流式细胞术检测;通过BD公司绝对细胞计数管验证上述流程的稳定性和可靠性.结果 Calcein-AM能在较低浓度(0.1～0.5 μmol/L)下对靶细胞在宽密度范围(0.1～10)×106/ml内进行很好标记,而且24 h内对细胞活率无影响,同时还能与未标记细胞进行很好的区分;整个流程具有很好的稳定性和可靠性.结论 建立并优化了Calcein-AM/PI双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒效应的方法,本方法除操作简单、重复性好、灵敏度高外,还能更好的区分死亡细胞的来源.
关键词：钙黄绿素-AMγδT细胞细胞毒活性流式细胞术
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：深圳市战略新兴产业发展专项资金课题(CYZZ20130329145313934)深圳市生物产业发展专项资金(2014年第三批扶持计划)深圳市生物产业发展专项资金(CXZZ20140509144527788)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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