二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体抑制人肺癌细胞生长的作用研究
蔡亚雄
张晋霞
姜浩武
于云飞
姚双娥
邓宁
1.暨南大学生命科学技术学院生物医学转化研究院广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106322.暨南大学生命科学技术学院生物医学转化研究院广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106323.暨南大学生命科学技术学院生物医学转化研究院广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106324.暨南大学生命科学技术学院生物医学转化研究院广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106325.暨南大学生命科学技术学院生物医学转化研究院广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,5106326.暨南大学生命科学技术学院生物医学转化研究院广东省分子免疫与抗体工程重点实验室,广州,510632
摘要：目的 研究二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体(ds-Diabody)对人肺癌A549细胞的体内外增殖抑制作用.方法 利用镍离子亲和层析和离子交换层析的方法纯化得到ds-Diabody,间接ELISA检测其抗原结合活性,CCK-8法检测ds-Diabody对人肺癌A549细胞的增殖抑制作用,Western blot分析其作用于肿瘤细胞的机制,Transwell检测其对肿瘤细胞迁移侵袭的影响.建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录各处理组裸鼠皮下移植瘤的体积及裸鼠体质量变化.免疫组化法检测肿瘤组织CD31和LYVE1的表达情况,初步探讨抗bFGF的人源性ds-Diabody抗体的抗肿瘤机制.结果 成功纯化得到具有抗原结合活性的ds-Diabody.CCK-8结果显示,纯化的ds-Diabody可剂量依赖性地抑制人肺癌A549细胞株的增殖.Western blot结果表明ds-Diabody能有效阻断与bFGF相关的MAPK和Akt通路.Transwell结果表明ds-Diabody可以显著抑制A549细胞的迁移及侵袭.裸鼠体内试验中,ds-Diabody抗体显著地抑制了肿瘤的生长,抑制率为86.54％.免疫组化的结果显示ds-Diabody抗体处理组肿瘤组织中微血管密度和淋巴管密度均有下降.结论 抗bFGF的人源性ds-Diabody抗体可有效地抑制人肺癌A549细胞的生长.
关键词：碱性成纤维细胞生长因子二硫键稳定的双链抗体人肺癌细胞血管新生淋巴管新生
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81372281)广东省科技计划(2015B020211009)科技计划(JCYJ20140416085544636)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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