人g2型溶菌酶的多克隆抗体制备及其在睾丸中的表达分析
黄鹏1
杨智昉1
谢君2
徐一新3
鲍建瑛1
曹晓娥1
张宁1
余龙4
1.上海健康医学院基础医学院,2002372.复旦大学遗传工程国家重点实验室, 上海,2004333.上海健康医学院药学院,2002374.复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海,200433
摘要：目的 以真核表达的人g2型溶菌酶(human goose-type lysozyme 2,LysG2)为免疫原制备抗LysG2的兔多克隆抗体,检测LysG2在睾丸组织中的定位,为阐明其生理功能提供线索.方法 对LysG2毕赤酵母GS115转化菌株进行高密度培养,甲醇诱导目的蛋白表达并通过甲壳素亲和色谱纯化,以重组蛋白为免疫原制备兔抗LysG2多克隆抗体.通过ELISA检测抗体效价后,对人体各组织、精子及精液标本进行Western印迹分析,并对人睾丸组织进行免疫组化检测.结果 以毕赤酵母表达LysG2为免疫原制备的抗体具有高效价,表达谱分析表明LysG2在睾丸中有表达,在精子蛋白提取物中没有检测到其存在,在精浆中检测到了LysG2.免疫组化检测结果显示LysG2在睾丸中主要定位于间质组织的Sertoli细胞.结论 本研究成功以真核表达的LysG2制备了该蛋白多克隆抗体,LysG2在睾丸Sertoli细胞有表达,并分泌到精浆中,提示LysG2可能在男性生殖系统先天性免疫中发挥作用.
关键词：人g2型溶菌酶毕赤酵母多克隆抗体睾丸先天性免疫
分类号：Q492.4(生殖生理学)R392.11(医学免疫学)
资助基金：上海市自然科学基金(15ZR1421800)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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