TGF-β1调控卵巢癌微环境中CD8+Treg的表型及功能初探
吴梦
陈献
娄鉴芳
黄珮珺
黄蕾
潘世扬
王芳
1.南京医科大学第一附属医院检验学部国家临床检验重点专科,2100292.南京医科大学第一附属医院检验学部国家临床检验重点专科,2100293.南京医科大学第一附属医院检验学部国家临床检验重点专科,2100294.南京医科大学第一附属医院检验学部国家临床检验重点专科,2100295.南京医科大学第一附属医院检验学部国家临床检验重点专科,2100296.南京医科大学第一附属医院检验学部国家临床检验重点专科,2100297.南京医科大学第一附属医院检验学部国家临床检验重点专科,210029
摘要：目的 初步探讨TGF-β1在卵巢癌微环境中对CD8+Treg诱导过程的作用.方法 建立卵巢癌细胞系SKOV3与健康人外周血CD8+T细胞体外Transwell共培养系统,实验组为SKOV3与健康人外周血CD8+T细胞共培养组,对照组为健康人外周血CD8+T细胞单独培养组,培养5d后收集2组共培养上清.ELISA法检测2组上清中TGF-β1水平.在上述共培养体系基础上增加anti-TGF-β1中和组,即在SKOV3与健康人外周血CD8+T细胞共培养体系中加入anti-TGF-β1中和抗体,共培养5d后收集3组CD8+T细胞.流式细胞术检测各组CD8+T细胞中Treg相关标志物(CD25、Foxp3、CD28)的表达率.将3组CD8+T细胞和na(i)ve CD4+T细胞按照1∶0、1∶1、1∶5、1∶10、0∶1的比例进行共培养,并在体系中加入anti-CD3及辐照的PBMCs,培养56 h后加入3H-TdR,继续培养16h后收集细胞,液体闪烁仪检测CPM值.结果 与CD8+T细胞单独培养组相比,SKOV3/CD8共培养组上清中高表达TGF-β1(P＜0.01).在共培养体系中加入anti-TGF-β1中和抗体后,与SKOV3/CD8共培养组相比,anti-TGF-β1中和组CD8+CD28-Treg、CD8+CD25+Treg和CD8+Foxp3+ Treg细胞比例显著下降,但相比CD8+T细胞单独培养组仍然升高.功能抑制试验结果显示,共培养组CD8+T细胞能抑制naive CD4+T细胞的增殖,anti-TGF-β1中和组仅在CD8+T细胞和naive CD4+T细胞比例为1∶1时对na(i)ve CD4+T细胞增殖呈现抑制作用,而单独培养组CD8+T细胞不能抑制na(i)ve CD4+T细胞的增殖.结论 anti-TGF-β1可部分中和卵巢癌微环境诱导的CD8+Tregs表型及功能,TGF-β1是卵巢癌细胞生长微环境诱导CD8+Treg分化过程重要的作用因素之一.
关键词：TGF-β1卵巢癌CD8+T细胞调节性T细胞
分类号：R737.31(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81272324)国家自然科学基金(81371894)江苏省实验诊断学重点实验室项目(XK201114)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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