金黄色葡萄球菌IsdA的B细胞免疫显性表位的鉴定及免疫保护效果的评价
王春华1
韩然2
胡佳丽3
韩允4
杨丹5
张大明6
1.白求恩国际和平医院,石家庄,0500002.贵州省人民医院消化科,贵阳,5500023.第三军医大学西南医院消化科,重庆,4000384.遵义市第一人民医院儿科,5630025.重庆医科大学检验医学系,4000166.西南大学工程技术学院,重庆,400715
摘要:目的 系统筛选鉴定金黄色葡萄球菌IsdA的B细胞免疫显性表位,并评价其免疫保护效果.方法 采用氨基酸步移策略,合成18 mer氨基酸重叠肽段.ELISA系统筛选鉴定IsdA的B细胞免疫显性表位肽段.免疫显性表位肽与KLH偶联后免疫Balb/c小鼠.分离免疫小鼠血清,ELISA检测免疫显性表位肽诱导的IgG抗体水平,并测定表位肽诱导产生抗体所介导的调理吞噬作用.末次免疫后2周,经尾静脉感染S.aureus Newman,监测感染攻毒后各组的小鼠的生存率以及检测主要靶器官肾脏的细菌定植量.结果 IsdA49-66aa、IsdA91-108aa、IsdA217-234aa、IsdA259-276aa均能与IsdA抗血清产生强烈IgG抗体反应.抗IsdA49-66aa、抗IsdA91-108aa抗IsdA217-234aa和抗IsdA259-276aa血清均能与重组的IsdA产生较强的抗原抗体反应.与Alum组相比,免疫IsdA49-66aa、IsdA91-108aa、IsdA217-234aa、IsdAzg-276aa后血清中的抗体能够显著增强抗体介导的中性粒细胞的调理吞噬作用(P<0.05),同时均显著提高了小鼠的生存率,并在感染后的第3天均显著降低肾脏的细菌定植(P<0.05).结论 成功鉴定出IsdA49-66aa、IsdA91-108aa、IsdA217-234aa、IsdA259-276aa为IsdA的B细胞免疫显性表位,显性表位肽IsdA49-66aa、IsdA91-108aa、IsdA217-234aa、IsdA259-276aa具有良好的免疫原性和免疫保护作用,可以作为金葡菌疫苗研究的重要候选表位疫苗组分.
关键词:金黄色葡萄球菌IsdA表位肽免疫保护调理吞噬作用
分类号:R392(医学免疫学)
资助基金:国家自然科学基金(81171526)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
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免疫学杂志

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ISSN:1000-8861
年,卷(期):2016,32(12)
所属栏目:技术与方法