骨骼肌特异表达卵清蛋白(OVA)抗原转基因小鼠构建
黄涛1
丁茂超2
史丹丹1
谷瑞彩1
肖将尉1
郭梦霞1
李俊桦1
廖华1
1.南方医科大学基础医学院解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室,广州,5105152.510515广州,南方医科大学基础医学院解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室;325035,温州医科大学人体解剖学教研室
摘要：目的 利用PiggyBAC转座酶系统及受精卵注射法,将MCK3E-OVA-pA随机插入小鼠基因组,获得骨骼肌特异表达卵清蛋白(OVA)的转基因小鼠(Muscle-OVA Tg).方法 通过体外转录,获得PiggyBAC mRNA;将PiggyBAC mRNA和含有鸡全长OVA片段、骨骼肌肌酸激酶启动子(MCK)、H-2Kb引导序列、H-2Db跨膜序列的质粒显微注射至C57BL/6J小鼠受精卵中,获得转基因阳性首建鼠.将Muscle-OVA Tg鼠与野生B6小鼠杂交建系.PCR鉴定小鼠基因型;Western blot检测小鼠各组织中OVA蛋白表达以验证其组织特异性.结果 PCR检测表明,Muscle-OVA Tg的肌组织表达OVA mRNA;Western blot进一步证实Muscle-OVA Tg小鼠骨骼肌组织特异的OVA蛋白表达,其他组织/器官,如心、脾、肺、肾组织OVA表达均呈阴性.结论 利用PiggyBAC转座酶系统成功构建骨骼肌特异表达鸡OVA抗原的转基因小鼠,为相关的骨骼肌免疫反应研究提供了有价值的动物模型.
关键词：卵清蛋白PiggyBAC转基因骨骼肌
分类号：R364.5(病理学)
资助基金：国家自然科学基金(81371924)国家自然科学基金(81572102)广东省自然科学基金(2014A030313276)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 733-736 )
英文信息