类鼻疽伯克霍尔德菌BPSS1622蛋白免疫原性鉴定与亚细胞定位
金浩龙1
胡艺2
李倩3
马腾飞3
韩丹3
胡志强3
毛旭虎3
1.400038重庆,第三军医大学第一附属医院医学检验系临床微生物及免疫学教研室;400037重庆,第三军医大学第二附属医院感染控制科2.第三军医大学第二附属医院感染控制科,重庆,4000373.第三军医大学第一附属医院医学检验系临床微生物及免疫学教研室,重庆,400038
摘要：目的 重组表达类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)BPSS1622蛋白并鉴定其免疫原性及亚细胞定位.方法 以pET-22b为表达载体,在大肠埃希菌BL21中表达BPSS1622蛋白;亲和层析纯化目的蛋白;用纯化后蛋白免疫新西兰兔获得抗血清;ELISA及Western blot鉴定纯化蛋白的免疫原性,并对类鼻疽杆菌BPSS1622蛋白进行亚细胞定位,探讨其生物学功能.结果 以菌株BPC006基因组DNA为模板,通过PCR获得目的基因,构建pET-22b/ BPSS1622重组质粒;转化至E.coli BL21获得工程菌株,经IPTG诱导表达、纯化得到了相对分子质量为22 000的目的蛋白;制备的抗血清ELISA效价高达1∶1 200000,并能与目的蛋白发生特异性抗原抗体反应;亚细胞定位发现BPSS1622蛋白定位于类鼻疽杆菌的胞壁及胞膜中.结论 成功克隆和表达了类鼻疽杆菌的BPSS1622蛋白,制备了免疫血清,该蛋白定位于细菌的细胞膜和细胞壁中,预测该蛋白具有ATP依赖的RNA解旋酶活性,为疾病诊断和预防奠定了基础.
关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌BPSS1622蛋白免疫血清亚细胞定位
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30973402)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 771-776 )
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