沉默NF-κB/p65对TNF-α诱导的肺泡Ⅱ型上皮NOX1基因表达的影响
吴炜景1
张家敏2
曾奕明2
李理3
黄文杰3
1.362000 泉州,福建医科大学附属第二医院呼吸与危重症医学科福建省呼吸医学中心;510010,解放军广州总医院呼吸科2.福建医科大学附属第二医院呼吸与危重症医学科福建省呼吸医学中心, 泉州,3620003.解放军广州总医院呼吸科,510010
摘要:目的 构建急性肺损伤肺泡Ⅱ型上皮A549细胞炎症模型,通过沉默NF-κB基因,观察NOX1基因表达水平及氧化应激指标变化,探讨NOX1基因与NF-κB/p65的相关性.方法 运用RNA干扰技术沉默NF-κB/p65基因,以TNF-α(10 ng/ml)刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),采用RT-PCR及Western blot检测NOX1基因表达水平,DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧水平,比色法检测细胞的总抗氧化能力、总谷胱甘肽、总超氧化物歧化酶活力和丙二醛的浓度.结果 采用TNF-α刺激肺泡Ⅱ型上皮A549细胞可以分别在基因和蛋白水平上调NOX1基因表达;同时,增加细胞丙二醛和活性氧浓度,降低总抗氧化能力、总谷胱甘肽及超氧化物歧化酶浓度,氧化应激程度放大(P<0.05).预转染NF-κB/p65 siRNA,可下调NOX1基因的表达,减少细胞丙二醛、活性氧生成,提高总抗氧化能力、总谷胱甘肽及超氧化物歧化酶浓度,氧化应激程度降低(P<0.05).结论 沉默NF-κB/p65基因,可有效下调TNF-α诱导A549细胞氧化应激程度及NOX1基因表达水平,提示NF-κB/p65可能参与调控TNF-α诱导的NOX1基因表达.
关键词:核因子κBNOX1基因氧化应激急性肺损伤
分类号:R563.1(呼吸系及胸部疾病)R563.8(呼吸系及胸部疾病)
资助基金:国家自然科学基金(81541002)福建省自然科学基金(2015J0102)福建省卫生厅青年科研课题(2013-2-51)福建省中青年教师教育科研项目(JB13085)泉州市科技计划(Z(2013)0206)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 943-948 )
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