两质粒系统重配甲型H1N1流感病毒株的研究
周珊珊1
杨晓岚2
孙芳2
程晋霞2
谷宏婧2
段跃强2
杨鹏辉2
王希良2
1.230601合肥,安徽医科大学研究生院;100071北京,军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室2.军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
摘要：目的 构建两质粒冷适应流感病毒拯救系统,提高流感病毒的重配效率.方法 本研究通过构建克隆载体pfastbac △plhHTB,将流感病毒A/Ann Arbor/6/60 (H2N2)6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS)的双向转录表达元件定向克隆入此载体,获得pfastbac△plhHTBP6.同时将流感病毒A/California/7/2009 (H 1N1)表面基因(HA、NA)双向转录表达元件定向克隆入pENTR-1A质粒,获得pENTR-1AP2.将2个重组质粒共转染MDCK/COSI细胞,细胞上清接种10日龄SPF鸡胚,收取尿囊液,血凝实验筛选阳性株,并进行全面鉴定.结果 本研究利用两质粒系统成功重配甲型H1N1流感病毒株,命名为TRG A/California/07/2009(H1N1) Vca,重配病毒株传代后HA效价为28,形态符合流感病毒典型特征,大小80～120 nm,具有冷适应、温度敏感表型.结论 两质粒流感病毒拯救系统为高效重配流感疫苗株提供了新策略.
关键词：反向遗传学两质粒系统流感病毒
分类号：R392-33(医学免疫学)
资助基金：国家重点研发计划(2017YFC1200800)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 353-358 )
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