靶向骨桥蛋白的小干扰RNA对MRL/Lpr小鼠狼疮肾炎的治疗作用
庞春艳1
张伟1
刘媛2
常志芳2
王永福1
1.014010,包头医学院风湿免疫研究所包头医学院第一附属医院风湿免疫科;内蒙古自治区自体免疫学重点实验室2.包头医学院风湿免疫研究所包头医学院第一附属医院风湿免疫科,014010
摘要：目的 观察骨桥蛋白(OPN)的小干扰RNA (siRNA)对SLE动物模型MRL/Lpr小鼠24 h尿蛋白、脾组织中Treg和Th17细胞的表达、肾脏的病理改变的影响,探讨OPN siRNA对狼疮肾炎的治疗作用.方法 25只MRL/Lpr小鼠随机分为对照组、空载体组、OPN-siRNA1组、OPN-siRNA2组及OPN-siRNA3组,每组5只,RT-PCR法检测小鼠肾脏组织中OPN mRNA的表达水平;免疫组化法检测小鼠肾脏组织中OPN蛋白的表达水平;考马斯亮蓝染色法检测24h尿蛋白含量;ELISA法检测小鼠血清中抗dsDNA抗体水平;流式细胞术检测小鼠脾组织中Treg细胞和Th17细胞的表达水平;病理切片苏木精-伊红(HE)染色法观察5组小鼠肾脏的病理变化.结果 OPN siRNA表达载体可以在MRL/Lpr小鼠的肾脏中表达;注射后6周OPN-siRNA1组、OPN-siRNA2组和OPN-siRNA3组中MRL/Lpr小鼠肾脏组织中OPN mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P＜0.05);MRL/Lpr小鼠的24h尿蛋白含量和抗dsDNA抗体在治疗前5组没有差异,OPN-siRNA作用后2周和4周小鼠24 h尿蛋白含量和抗dsDNA抗体水平下降,随着OPN-siRNA作用时间的延长小鼠24 h尿蛋白含量和抗dsDNA抗体水平逐渐下降,注射后6周MRL/Lpr小鼠的24 h尿蛋白含量和抗dsDNA抗体开始升高,但仍低于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P＜0.05);OPN-siRNA作用后MRL/Lpr小鼠脾组织中Th17细胞占CD4+T细胞的百分比明显下降,而Treg细胞占CD4+T细胞的百分比上升,与对照组和空载体组比较差异有统计学意义(P＜0.05);OPN-siRNA作用后肾小球减小、肾小球的浸润的炎性细胞减少,与对照组和空载体组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MRL/Lpr小鼠注射OPNsiRNA载体后,OPN mRNA和蛋白的表达水平下降,24 h尿蛋白含量和抗dsDNA抗体水平下降,脾组织中Th17细胞的百分比下降,Treg细胞的百分比上升,肾脏中炎性细胞的浸润减少,说明OPNsiRNA可调节狼疮小鼠Th17/Treg细胞的平衡并对狼疮肾炎有一定的治疗作用.
关键词：狼疮肾炎骨桥蛋白小干扰RNA24 h尿蛋白抗dsDNA抗体
分类号：R593.2(全身性疾病)
资助基金：国家自然科学基金(30960354)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 393-400 )
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