人γδT细胞能够识别肿瘤相关蛋白AGR2
董青青
陈慧
张建民
何维
1.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家分子生物学重点实验室,北京,1000052.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家分子生物学重点实验室,北京,1000053.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家分子生物学重点实验室,北京,1000054.中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家分子生物学重点实验室,北京,100005
摘要：目的 筛选人外周血γδ T细胞识别的肿瘤相关蛋白配体,为阐明γδ T细胞的抗原识别机制及抗肿瘤免疫效应机制奠定基础.方法 以3种特异性结合肿瘤的CDR3δ序列合成肽为探针,通过人类全蛋白质组芯片筛选CDR3δ合成肽相互作用的蛋白;流式细胞术检测蛋白在肿瘤细胞系的表达;原核表达纯化肿瘤相关蛋白AGR2(前梯度2蛋白),ELISA验证其与探针肽的结合;固相化包被蛋白,检测人外周血单个核细胞中γδT细胞的活化相关分子的表达;乳酸脱氢酶释放法检测蛋白对γδT细胞体外细胞毒活性的作用.结果 生物素标记的CDR3δ肽,共筛选到与蛋白质组芯片结合的候选蛋白配体共6种,分别是PHF21A、LDB3、SYF2、PPP1R14A、AGR2和SYAP1;流式结果显示AGR2在几种肿瘤细胞系细胞中均有表达,但表达水平不一致;ELISA结果显示GST-AGR2能特异性地结合CDR3δ肽OT3;固相包被GST-AGR2,能显著促进γδ T细胞活化相关分子CD69、CD25的表达;与GST-AGR2预孵育能在体外显著促进γδ T细胞对MDA-MB-231和MCF-7细胞的细胞毒作用.结论 肿瘤相关蛋白AGR2能够在体外促进γδ T细胞的活化,增强γδ T细胞对乳腺癌细胞的细胞毒活性,可能是γδ T细胞识别的肿瘤相关蛋白配体.
关键词：γδT细胞蛋白芯片肿瘤蛋白配体前梯度2蛋白
分类号：R3922.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(31500725)国家自然科学基金(91542117)国家自然科学基金(81673010)北京协和医学院协和青年基金(3332015111)创新工程项目(2016-12M-1-008)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 658-665,673 )
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