Tim-3对人Jurkat T细胞NFAT信号通路的调控
吴培1
刘军2
张放2
王柏秋2
1.201201上海,辉源生物科技(上海)有限公司;200433上海,复旦大学生命科学学院2.辉源生物科技(上海)有限公司,上海,201201
摘要：目的 利用基因过表达技术来研究关键免疫检查点Tim-3对人T淋巴细胞NFAT信号通路的调控作用.方法 将NFAT-RE-Nluc、Tim-3基因编码序列制备成相应的慢病毒质粒,通过Fugene HD转染或者慢病毒介导的基因过表达技术,将NFAT-RE-Nluc和Tim-3基因编码序列导入到JurkatT细胞中,通过萤光素酶报告基因检测系统检测细胞中的荧光信号强度.结果 Tim-3和NFAT-RE-Nluc成功在人T淋巴细胞中表达,并且Tim-3成功定位到细胞膜上.Tim-3能够直接激活人T淋巴细胞的NFAT信号通路,诱导NFAT-RE-Nluc荧光素酶的表达.同时在JurkatT细胞中,Tim-3也能够增强CD3抗体激活NFAT信号通路,诱导CD69的表达以及IL-2分泌的能力.结论 成功构建了稳定表达Tim-3及NFAT-RE-Nluc报告基因的NFAT-RE-Nluc Tim-3细胞株,为深入研究Tim-3与其配体Galectin-9或CEACAM1之间的相互作用,及筛选阻断Tim-3-Galectin-9-CEACAM1的更有效的新型免疫检查点药物提供了重要的基础.
关键词：Tim-3NFAT-RE-Nluc免疫检查点基因过表达慢病毒
分类号：Q81(生物工程学(生物技术))
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 77-83 )
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