缺氧诱导血管内皮细胞中Runx1表达及其功能的初步研究
罗羽莎1
谭小玲2
李满满3
杨诚忠2
杨戎1
1.重庆医科大学干细胞与细胞工程研究室,4000162.陆军军医大学高原军事医学系高原生理学与病理学教研室,重庆,4000383.湖北省妇幼保健院生殖中心,武汉,430070
摘要：目的 探讨缺氧条件下人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)中Runx1 (Runt-related transcription factor 1)的表达及其在细胞损伤和炎症分子表达调控中的作用.方法 采用缺氧工作站模拟缺氧环境(1％O2),常氧组细胞于普通培养箱(21％O2)中常规培养.采用qRT-PCR和Western blot技术检测目的基因表达水平;采用乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测培养上清LDH活性;以葡萄糖转运体-1(glucose transporter 1,Glut1)的转录水平反映缺氧诱导因子1(hypoxia induced factor 1,HIF-1)的转录活性,以Bcl-2/Bax蛋白比值反应细胞凋亡通路的活性.结果 qRT-PCR和Western blot的结果显示,与常氧组相比,缺氧组HUVEC细胞中Runx1持续高表达(P＜0.05);经脯氨酸羟化酶抑制剂(dimethyloxalylglycine,DMOG)和去铁酰胺(desferrioxamine,DFX)处理后,常氧组HUVEC中缺氧诱导因子1亚基α(HIF-1α)蛋白和Glut1的mRNA水平增加,Runx1的mRNA也显著增加;分别干扰缺氧组HUVEC细胞和DFX处理组细胞中HIF-1α表达后,Runx1的mRNA显著下降,与各组干扰序列对照组相比,差异均有显著意义(P＜0.05).缺氧24h时细胞培养上清的LDH活性显著升高,Bcl-2/Bax蛋白水平的比值显著下调,同时,缺氧组HUVEC中炎症分子TNF-α、IL-1β、ICAM的mRNA水平显著增加,与常氧组相比,差异均具有显著意义(P＜0.05).干扰Runx1表达后,缺氧组细胞培养上清中LDH活性显著降低,Bcl-2/Bax蛋白水平的比值显著上调,炎症分子mRNA水平显著下调,与各组对照组相比,差异均具有显著意义(P＜0.05).结论 缺氧以HIF-1依赖的方式诱导血管内皮细胞中Runx1表达;Runx1通过介导血管内皮细胞损伤和炎症因子的表达,参与缺氧内皮细胞功能紊乱.
关键词：Runx1缺氧诱导因子-1细胞损伤炎症分子缺氧
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81270108)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 277-284,292 )
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