结核分枝杆菌Ag85B-mRNA疫苗的体外合成及其免疫原性研究
夏敏1
杨晓岚1
杨鹏辉2
王希良1
1.军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物国家重点实验室,100071 北京2.中国人民解放军总医院第五医学中心,100039 北京
摘要：目的 体外转录结核分枝杆菌Ag85B-mRNA并评价其免疫原性.方法 结合密码子偏好性、GC含量和mRNA二级结构的自由能, 优化Ag85B编码区序列, 并在其两端插入β球蛋白3'和5'UTR序列.合成目的序列, 进行体外转录.经琼脂糖凝胶电泳鉴定正确, 体外转染细胞验证其表达后, 联合鱼精蛋白免疫Balb/c小鼠, 检测特异性细胞免疫应答.结果 Ag85B优化序列二级结构分析显示, 其具有更高的稳定性.成功体外合成稳定的Ag85B-Mrna.Western blot检测Ag85B-Mrna转染293T细胞24、48 h, 均有清晰特异性的目的蛋白条带.小鼠免疫试验结果显示, Ag85B-Mrna可诱导针对结核分枝杆菌Ag85B分泌高水平IFN-γ的Th1型免疫应答.结论 成功体外合成稳定的Ag85B-Mrna疫苗, 具有较好的免疫原性, 为新型结核疫苗的研制提供新思路.
关键词：Ag85BmRNA疫苗序列设计免疫评价
分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 404-408 )
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