乳铁蛋白负向调控TLR2激动剂诱导的人肺上皮细胞细胞因子分泌
曹二龙
谭潇
刘选梅
肖非
马婷
贺印旎
1.邵阳学院医学检验学院医学检验技术教研室,4220002.邵阳学院医学检验学院医学检验技术教研室,4220003.邵阳学院医学检验学院医学检验技术教研室,4220004.邵阳学院医学检验学院医学检验技术教研室,4220005.邵阳学院医学检验学院医学检验技术教研室,4220006.邵阳学院医学检验学院医学检验技术教研室,422000
摘要：目的 观察乳铁蛋白对Toll样受体2(TLR2)激动剂Pam3CSK4刺激人肺上皮细胞分泌促炎细胞因子的影响,并探索其潜在的机制.方法 体外培养人肺上皮细胞系NCI-H292,采用100 ng/ml Pam3CK4联合100、200和400 μg/ml乳铁蛋白孵育细胞.ELISA检测乳铁蛋白处理前后培养上清TNF-α和IL-8分泌的变化;实时定量PCR和ELISA检测短腭、肺及鼻咽上皮克隆1 (SPLUNC1)蛋白和mRNA表达的影响.提取细胞核蛋白,ELISA测定乳铁蛋白处理前后NF-κB活性的变化,采用Western blot检测IκB的表达;并用siRNA沉默NCI-H292细胞SPLUNC1,观察其对TNF-α和IL-8分泌的影响.结果 100、200和400μg/ml乳铁蛋白预处理肺上皮细胞后,可下调Pam3CK4诱导分泌TNF-α和IL-8.实时定量PCR结果显示,100、200和400μg/ml乳铁蛋白处理后,SPLUNC1 mRNA水平明显增高,并呈一定的剂量依赖性,ELISA也得到了类似的结果.采用转录和翻译抑制剂放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)预处理,可显著降低乳铁蛋白诱导SPLUNC1的表达.此外,乳铁蛋白处理可抑制Pam3CK4激活NF-κB,主要表现为NF-κB的DNA结合活性降低、IκB降解减少.siRNA沉默SPLUNC1表达后,可明显削弱乳铁蛋白对TNF-α和IL-8的抑制作用.结论 乳铁蛋白对Pam3CK4诱导的细胞因子分泌具有抑制作用,其机制与上调SPLUNC1表达、抑制NF-κB的活性有关.
关键词：乳铁蛋白Toll样受体2细胞因子
分类号：R392.9(医学免疫学)
资助基金：邵阳市科技计划(2017ZD08)2016年度校级大学生研究性学习和创新性实验计划(校发[2016]11号)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 780-784 )
英文信息