抑制内质网钙离子释放在诱导巨噬细胞自噬及逆转LPS耐受中的作用
吴嘉麒
刘鑫
王宁
郑江
1.400038重庆,陆军军医大学第一附属医院临床医学研究中心2.400038重庆,陆军军医大学第一附属医院临床医学研究中心3.400038重庆,陆军军医大学第一附属医院临床医学研究中心4.400038重庆,陆军军医大学第一附属医院临床医学研究中心
摘要：目的 观察LPS耐受巨噬细胞自噬水平以及抑制内质网Ca2+释放是否具有上调自噬水平和逆转LPS耐受的作用.方法 分离Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞,LPS 5 ng/ml诱导耐受4h,随后给予LPS 100 ng/rr刺激,ELISA检测TNF-α和IL-6水平,Western blot和免疫荧光检测自噬蛋白(Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ)表达水平,Fluo-4 AM探针检测胞内Ca2+浓度;在LPS刺激的同时给予胞内Ca2+螯合剂(BAPTA)或内质网IP3通道阻断剂(2-APB)或CaMKⅡ抑制剂(KN-93),检测对自噬蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ表达以及TNF-α释放的影响.结果 LPS耐受细胞经LPS再次刺激后,TNF-α、IL-6释放明显减少,自噬水平也显著下降,同时胞内Ca2+水平异常增高;给予BAPTA或2-APB或KN-93能够降低胞内Ca2+水平,上调LC3-Ⅱ/Ⅰ表达,增加TNF-α释放.结论 LPS耐受的巨噬细胞自噬水平显著降低,抑制内质网Ca2+通路是上调自噬水平并逆转LPS耐受的有效途径.
关键词：LPS耐受炎症因子自噬钙离子
分类号：R392.12(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81772137)国家自然科学基金(81601716)
论文发表日期：2020-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 11-16 )
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