结核分枝杆菌Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6融合基因DNA疫苗株的构建及免疫原性研究
张真1
赵玲娜2
申梦2
王希良2
杨鹏辉3
包金风1
1.010059呼和浩特,内蒙古医科大学基础医学院2.100071北京,军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所/病原微生物与生物安全国家重点实验室3.100039北京,中国人民解放军总医院第五医学中心
摘要：目的 构建结核分枝杆菌Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6 DNA候选疫苗株并鉴定,初步评价其免疫原性.方法 从GenBank中获取M.tuberculosis H37Rv的Ag85B、ESAT6和Hsp65基因序列优化后合成,经PCR、酶切、连接与真核表达载体PVAX1重组,构建重组质粒PVAX1-Hsp65-Ag85B和PVAX1-Hsp65-ESAT6.重组质粒体外转染验证其表达后,免疫C57BI/6小鼠,检测特异性细胞免疫应答反应.结果 Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6 DNA疫苗株在体内外均能表达,Western blot结果显示,DNA疫苗株体外转染293T细胞,24 h可检测到特异性蛋白条带,48 h蛋白表达量达最高.小鼠体内实验表明,Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6 DNA疫苗株均可激发较强的免疫反应,可诱导机体产生分泌高水平TNF-α的Th型免疫应答,且Hsp65-Ag85B优于Hsp65-ESAT6.结论 Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6 DNA疫苗株均具有较强的免疫原性,呈Th型细胞介导的免疫应答,推测Hsp65-Ag85B DNA疫苗的保护效力优于Hsp65-ESAT6,为新型结核DNA疫苗研制提供了实验依据.
关键词：DNA疫苗Ag85BESAT6Hsp65分枝杆菌
分类号：R392.5(医学免疫学)
论文发表日期：2020-02-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 109-115 )
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