共表达细胞因子IL-7和趋化因子CCL19/CCL21的第4代anti-CD19CAR-T细胞的开发与应用
赵文静1
于琪英2
胡浩2
顾潮江2
王楠1
何红鹏1
罗学刚1
马文建1
张同存3
1.300457,天津科技大学生物工程学院2.430000,武汉科技大学生命科学与健康学院3.300457,天津科技大学生物工程学院;430000,武汉科技大学生命科学与健康学院
摘要：目的 初步探讨共表达细胞因子IL-7和趋化因子CCL19或CCL21的anti-CD19 CAR-T细胞的功能特性及其在体外对人CD19+急性淋巴细胞白血病(B-ALL)的杀伤效果,旨在优化CAR-T细胞各项功能,增强其对血液瘤、实体瘤的治疗效果.方法 通过亚克隆技术获得重组慢病毒质粒,慢病毒包装,转导原代T细胞获得2种第4代anti-CD19CAR-T细胞,分别命名为7×19 CAR-T细胞、7×21 CAR-T细胞.借助流式细胞仪和相关试剂盒检测了细胞CAR分子的转导效率、CAR-T细胞的趋化能力、增殖及凋亡情况等;钙黄绿素释放法检测CAR-T细胞的杀伤作用;共培养法检测CAR-T细胞因子的释放情况;2种第4代anti-CD19 CAR-T细胞组皆于原代T细胞、常规anti-CD19 CAR-T细胞作比较.结果 7×19 CAR-T、7×21 CAR-T细胞的功能特性皆有显著提高,主要表现在细胞增殖速度加快、细胞凋亡速率明显变慢、炎症因子IFN-γ、肿瘤坏死因子TNF-α的分泌量皆有所增加;且体外杀伤实验表明阳性率约40％的7×19 CAR-T、7×21 CAR-T细胞对CD19+肿瘤细胞Raji的杀伤效率高于阳性率约50％ anti-CD19 CAR-T细胞(P＜0.01);结论实验数据显示共表达细胞因子IL-7和趋化因子CCL19或CCL21的第4代anti-CD19 CAR-T细胞即7×19 CAR-T和7×21 CAR-T细胞相比第3代anti-CD19 CAR-T细胞和T细胞在趋化能力、细胞增殖、细胞凋亡、体外杀瘤效果以及细胞炎症因子的释放能力等方面皆有显著改善,初步证明了7×19 CAR-T细胞和7×21 CAR-T细胞的各项功能有所优化,对CD19+人急性淋巴细胞白血病治疗效果得到改善,为开发靶向CD19的新型CAR-T细胞提供了新思路,这种模式也为其它类型CAR-T细胞的开发开创了典范.
关键词：嵌合抗原受体第4代anti-CD19 CAR-T细胞:细胞因子IL-7趋化因子CCL19/CCL21急性B淋巴细胞白血病
分类号：R733.71(造血器及淋巴系肿瘤)R730.51(一般性问题)
资助基金：国家重点研发计划(2017YFD0400304)
论文发表日期：2020-04-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 348-357 )
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