前列腺癌源性外泌体通过MMP家族蛋白酶调控骨髓源性免疫抑制细胞的迁移能力
黎楠
徐浩宇
王和西
张尧
1.400016,重庆医科大学附属第一医院泌尿外科2.400016,重庆医科大学附属第一医院泌尿外科3.400016,重庆医科大学附属第一医院泌尿外科4.400016,重庆医科大学附属第一医院泌尿外科
摘要：目的 探讨前列腺癌来源的外泌体(exosomes)是否通过上调骨髓源性免疫抑制细胞(MDSCs)的金属基质蛋白酶(matrix metalloproteinase) MMP9、MMP2的分泌,进而增强MDSCs向外周迁移的能力.方法 通过超速离心法提取鼠源性前列腺癌RM-1细胞上清中的外泌体,电镜观察外泌体的典型形态,Western blot鉴定外泌体的表面标记蛋白.流式细胞术检测荷瘤小鼠不同时间段肿瘤组织中MDSCs的比例,以及外泌体注射至正常小鼠体内后骨髓、脾脏中MDSCs的比例变化.免疫磁珠提取正常小鼠骨髓中的MDSCs,将MDSCs与RM-1-exosomes(50 μg)共培养24h后,免疫荧光观察MDSCs对外泌体的摄取情况.Western blot检测MDSCs表达MMP9、MMP2蛋白的情况,并用侵袭迁移实验检测MDSC与外泌体共培养前后的穿透能力.结果 电镜下观察RM-1来源的外泌体呈典型椭圆碟形结构,直径约为30～100 nm.其表面标志蛋白CD63、HSP70、TSG101高表达验证了提取物质为外泌体.MDSCs与外泌体共培养后,免疫荧光可观察到MDSCs能大量摄取RM-1-exosome,侵袭迁移实验显示共培养后的MDSCs穿透基底膜的能力显著增强(P＜0.05).Westemblot验证了共培养后的MDSCs表达MMP9、MMP2蛋白较空白组明显升高(P＜0.05).结论 前列腺癌细胞来源的外泌体可通过增加MDSCs分泌MMP9、MMP2蛋白从而增强MDSCs向外周迁移的能力.
关键词：前列腺癌外泌体骨髓源性抑制细胞(MDSCs)金属基质蛋白酶迁移
分类号：R737.25(泌尿生殖器肿瘤)R392.12(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81272572)
论文发表日期：2020-06-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 461-467 )
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