Ghrelin抑制Aβ25-35诱导的BV-2细胞炎症反应及改善细胞线粒体功能的机制研究
李雪1
王浩2
彭师嘉3
赵宇1
赵洪艳1
耿晓波1
1.161000,齐齐哈尔医学院附属第三医院老年科2.161000,齐齐哈尔医学院附属第二医院电生理科3.161000,齐齐哈尔市中医院CT室
摘要：目的 探讨在小鼠小胶质细胞BV-2中过表达Ghrelin对Aβ诱导炎症反应及细胞线粒体功能的影响及相关机制.方法 应用慢病毒介导Ghrelin过表达载体感染小鼠小胶质细胞BV-2,免疫荧光观察感染效率,应用RT-PCR及Western blot检测慢病毒感染后细胞中Ghrelin mRNA和蛋白的表达水平;Aβ25-35预处理过表达Ghrelin的BV-2后,利用ELISA、CCK-8、Annexin-V FITC/PI流式细胞术及JC-1法和免疫组化实验检测炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6的分泌水平及细胞增殖、凋亡、线粒体膜电位及胞质中ROS及Cyt-C的表达;电子显微镜下观察过表达Ghrelin后,Aβ25-35对BV-2细胞中凋亡小体产生的影响;Westernblot检测上述处理后BV-2细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9的表达.结果 免疫荧光显示慢病毒介导Ghrelin过表达载体的感染效率可达85％以上,慢病毒感染的BV-2细胞中Ghrelin mRNA和蛋白的表达显著升高;ELISA及CCK-8、Annexin-V FITC/PI流式细胞术及JC-1法和免疫组化实验结果表明,过表达Ghrelin可明显抑制Aβ25-35对BV-2细胞所诱导的促进炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6分泌作用且细胞的增殖能力及凋亡率显著下降,细胞的膜电位明显下调,ROS及Cyt-C的表达显著减少;电子显微镜下观察发现,过表达Ghrelin后可明显抑制Aβ25-35对BV-2细胞中促进凋亡小体产生的作用;Western blot实验结果显示,处理后的BV-2细胞中促凋亡蛋白Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9表达显著下降,而凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达明显增加.结论 过表达Ghrelin可抑制Aβ25-35对小胶质细胞BV-2所诱导的炎症反应,并通过线粒体凋亡途径抑制后者诱导的细胞凋亡的现象.
关键词：GhrelinAβ细胞凋亡线粒体膜电位ROSCyt-C凋亡小体
分类号：R741(神经病学)
论文发表日期：2020-07-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 562-571 )
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