黑色素瘤细胞来源的外泌体通过上调Treg的CXCR3促进其趋化
颜丽雅1
陈欣2
薛雅方3
1.317523,台州市中西医结合医院皮肤科2.317523,台州市中西医结合医院泌尿科3.400038重庆,陆军军医大学西南医院超声科
摘要:目的 检测黑色素瘤细胞通过外泌体途径上调CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryT cell,Treg) CXCR3(chemokine receptor 3)受体表达,提高Treg向肿瘤免疫抑制微环境趋化的能力.方法 以超速离心法纯化小鼠黑色素瘤细胞B16上清中的外泌体,透射电镜检测外泌体形态,Western blot检测外泌体标记性蛋白的表达.B16细胞荷瘤小鼠.流式细胞术检测荷瘤小鼠(1、2、3周)和尾静脉注射外泌体后脾脏、肿瘤内Treg的频率.磁珠法分离纯化小鼠的Treg;Transwell实验检测Treg的趋化能力.Western blot检测Treg的CXCR3、p-Smad2的表达水平.结果 电镜结果显示,B16细胞释放的外泌体为直径30~100 nm的圆形或类圆形结构;高表达标志性蛋白CD63和Alix,不表达Calnexin.在外泌体刺激下Treg的趋化能力显著增强,但可被抗CXCR3的单克隆抗体阻断.Western blot结果显示外泌体可提高Treg细胞内Smad2的磷酸化,并上调CXCR3的表达水平,Treg的趋化能力随之增强.结论 B16细胞来源的外泌体通过Smad2磷酸化途径提高了Treg细胞内CXCR3的表达,进而增强其趋化能力.
关键词:外泌体Treg黑色素瘤细胞CXCR3B16
分类号:R739.5(皮肤肿瘤)
论文发表日期:2020-09-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 790-795 )
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