LRRFIP1基因干扰对脂多糖诱导的支气管上皮细胞炎症、氧化应激和细胞凋亡的影响
陆芬
汤健
1.210008,南京医科大学附属儿童医院康复医学科2.210008,南京医科大学附属儿童医院康复医学科
摘要：目的 探讨富亮氨酸重复序列相互作用蛋白1 (LRRFIP1)基因对脂多糖(LPS)诱导的支气管上皮细胞炎症、氧化应激和细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 使用LPS处理人支气管上皮细胞株16HBE,并利用Lipofectamine 2000试剂将si-LRRFIP1转染到16HBE细胞,实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测LRRFIP1 mRNA表达;免疫印迹试验(Western blot)检测LRRFIP1、细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、p65、磷酸化p65(p-p65)、IκBα和IκBα和磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白表达;噻唑蓝(MTT)检测细胞活力;试剂盒检测细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)水平和炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 LPS诱导的16HBE细胞中LRRFIP1 mRNA、LRRFIP1蛋白表达量、Cleaved caspase-3、Bax、p-p65、p-IκBα蛋白表达量、MDA、LDH、IL-1β、IL-6、TNF-α水平和细胞凋亡率显著提高(P＜0.05),CyclinD1、Bcl-2蛋白水平、细胞活力、SOD活性和IL-10水平明显降低(P＜0.05),而p65和IκBα蛋白表达量无显著变化.抑制LRRFIP1明显减少LPS诱导的16HBE细胞中LRRFIP1、Cleavedcaspase-3、Bax、p-p65、p-IκBα蛋白表达量、MDA、LDH、IL-1β、IL-6、TNF-α水平和细胞凋亡率(P＜0.05),并显著增加CyclinD1、Bcl-2蛋白水平、细胞活力、SOD活性和IL-10水平(P＜0.05),对p65和IκBα蛋白水平无明显影响.结论 抑制LRRFIP1可能通过下调NF-κB信号通路活性及促进脂多糖损伤的支气管上皮细胞的增殖,减轻细胞炎症和氧化应激,并抑制细胞凋亡.
关键词：LRRFIP1支气管上皮细胞炎症氧化应激NF-κB信号通路
分类号：R562.2(呼吸系及胸部疾病)
论文发表日期：2020-10-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 846-852 )
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