miR-183靶向CX3CL1基因调控肝癌细胞MICA/B表达和增加NK细胞对肝癌细胞杀伤作用
靳海科1
刘意2
武卫3
1.455000安阳,河南护理职业学院微生物与免疫学教研室2.450052,郑州铁路职业技术学院医学技术与工程学院3.450052,郑州大学第二附属医院检验科
摘要：目的 探讨miR-183对肝癌细胞MHC-I类相关蛋白A/B(MICA/B)表达和自然杀伤(NK)细胞杀伤作用影响及其分子机制.方法 实验设置miR-con组、miR-183组、anti-miR-con组、anti-miR-183组、pcDNA组、pcDNA-CX3CL1 组、anti-miR-183+si-con组、anti-miR-183+CX3CL1组、对照(NC)组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-183和CX3CL1 mRNA表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测CX3CL1、MICA和MICB蛋白表达;流式细胞术检测肝癌细胞表面MICA/B的表达;NK细胞与肝癌细胞共培养后,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测NK细胞对肝癌细胞的杀伤作用;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测肝癌细胞与NK细胞共培养后培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素γ(IFN--γ)水平;荧光素酶报告实验检测miR-183和CX3CL1的靶向关系.结果 肝癌组织和肝癌细胞中miR-183高表达,CX3CL1、MICA和MICB低表达.干扰miR-183表达和过表达CX3CL1,肝癌细胞中MICA、MICB阳性表达率显著升高,与NK细胞共培养后TNF-α和IFN-γ水平显著升高,NK细胞对肝癌细胞的杀伤率显著升高(P＜0.05).miR-183靶向调控CX3CL1,沉默CX3CL1逆转了干扰miR-183对肝癌细胞MICA/B表达和NK细胞杀伤作用的影响.结论 抑制表达miR-183可增加肝癌细胞MICA/B表达,增加NK细胞对肝癌细胞的杀伤作用,其机制可能与CX3CL1有关.
关键词：miR-183CX3CL1肝癌MICA/B自然杀伤细胞杀伤作用
分类号：R392(医学免疫学)
论文发表日期：2021-03-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 192-201 )
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