小鼠干扰素epsilon的重组表达与抑菌活性鉴定
唐攀1
代宇婕1
谢秋波2
刘威3
张庆华1
1.400042重庆,陆军军医大学大坪医院妇产科2.400038重庆,陆军军医大学西南医院全军泌尿外科研究所3.400038重庆,陆军军医大学西南医院全军免疫学研究所
摘要：目的 通过昆虫细胞杆状病毒表达系统获得稳定表达的可溶性重组小鼠IFN-ε(rmIFN-ε).方法 构建pFastBac-mIfnε重组质粒,转座到Bacmid获得重组杆粒,转染sf9细胞表达rmIFN-ε;通过HisTrap亲和层析柱与Superdex 75分子筛层析纯化获得高纯度目的 蛋白,通过质谱分析进行肽指纹谱鉴定;建立雌性小鼠绝经后泌尿道感染模型,膀胱灌注rmIFN-ε后观察rmIFN-ε对于小鼠受损膀胱上皮的保护.结果 rmIFN-ε可在昆虫细胞中稳定表达,SDS聚丙烯凝胶电泳显示目标蛋白的表观相对分子质量与理论相对分子质量一致,质谱检测证实纯化后的蛋白确实为mIFN-ε,并对绝经后小鼠泌尿道感染有一定的保护作用.结论 成功获得重组小鼠IFN-ε的可溶性表达,纯化后的蛋白具有明显抑菌活性,说明表达产物具有正确的分子构象与生物学活性,为下一步研究奠定了物质基础.
关键词：干扰素Bac-to-Bac表达系统纯化
分类号：Q71(生物大分子的结构和功能)
论文发表日期：2021-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 824-828 )
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