miR-577靶向Ku80调控小细胞肺癌细胞中PD-L1表面表达的机制研究
何淼
杨桄权
黄虹超
李超
张友才
618000,德阳市人民医院肿瘤科
摘要：目的 探讨DNA损伤引起小细胞肺癌细胞NCI-H1688中PD-L1表面表达的潜在分子机制.方法 使用DNA损伤诱导剂ETP、CPT、APH处理小细胞肺癌细胞NCI-H1688后,检测细胞中PD-L1的蛋白水平和mRNA水平.通过高通量测序检测ETP、CPT、APH处理小细胞肺癌细胞NCI-H1688前后miRNA表达差异.过表达差异miRNA,检测细胞中PD-L1的mRNA水平.通过miRDB在线分析和荧光素酶报告实验寻找miRNA的靶标.结果 ETP、CPT、APH诱导小细胞肺癌细胞NCI-H1688 DNA损伤后,PD-L1的表达在mRNA水平和蛋白水平上均上升(P＜0.05).将ETP、CPT、APH处理小细胞肺癌细胞NCI-H1688后的高通量测序结果取交集后,共有11种基因的表达受到调控.敲低上述基因后发现,敲低Ku80时,PD-L1的表达上升(P＜0.05).过表达Ku80后,PD-L1的表达下降(P＜0.05).ETP、CPT、APH处理小细胞肺癌细胞NCI-H1688后,Ku80的mRNA水平下降(P＜0.05),但是Ku80的启动子活性没有显著变化(P＜0.05).miRNA mimics过表达miRDB在线分析Ku80的潜在miRNA后,发现10种miRNA能够显著降低Ku80的表达(P＜0.05).ETP、CPT、APH处理小细胞肺癌细胞NCI-H1688后,miR-577的表达水平显著上升(P＜0.05).过表达miR-577后,Ku80的mRNA和蛋白水平均上升(P＜0.05);敲低miR-577后,Ku80的mRNA和蛋白水平均下降(P＜0.05).过表达miR-577后,PD-L1的mRNA和蛋白水平均下降(P＜0.05);敲低miR-577后,PD-L1的mRNA和蛋白水平均上升(P＜0.05).结论 miR-577通过靶向DNA损伤应答蛋白Ku80 mRNA的3端非编码区以影响其翻译水平,最终提高了PD-L1在小细胞肺癌细胞NCI-H1688中的表达水平.
关键词：miR-577Ku80小细胞肺癌NCI-H1688PD-L1
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
论文发表日期：2021-12-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1058-1064 )
英文信息