TNF-α通过NF-κB增强Th9细胞分化抑制肺癌细胞生长
李彦1
顾泽鑫2
孟祥茹1
兰冰1
李静龙3
李翠翠1
1.161000,齐齐哈尔医学院附属第二医院呼吸内一科2.161000,齐齐哈尔医学院附属第二医院呼吸二科3.161000,齐齐哈尔医学院附属第二医院胸外科
摘要：目的研究TNF-α通过NF-κB增强Th9细胞分化抑制肺癌细胞生长的功能并对其相关机制进行初步探讨.方法 分离野生型小鼠脾脏CD4+T细胞,体外诱导Th9细胞分化.荧光定量PCR检测IL-9、IL-5和IL-13表达,ELISA检测Th细胞分泌IL-9变化.荧光定量PCR检测TNF-α在不同时间点对Th9细胞中IL-9表达的影响;TNF-α刺激分化的Th9细胞,免疫印迹检测NF-κB通路相关蛋白p-IKKα/β和IkB-α表达.使用NF-κB通路阻断剂,荧光定量PCR检测IL-9、IL-5和IL-13的表达.将体外TNF-α刺激诱导分化的Th9淋巴细胞通过尾静脉注射入肺癌小鼠体内,荧光定量PCR检测小鼠脾脏中IL-9、IL-5和IL-13的表达,免疫印迹检测小鼠肺癌组织中凋亡蛋白Bax/Bc12表达,免疫荧光染色检测小鼠肺癌组织细胞增殖情况.结果 荧光定量PCR显示,TNF-α联合Th9极化细胞因子TGF-β和IL-4增加Th细胞中IL-9、IL-5和IL-13的表达;ELISA实验结果显示,Th细胞分泌IL-9明显增多;荧光定量PCR显示,TNF-α处理后的Th9细胞中IL-9的表达在第2天或第3天达到最高水平;免疫印迹实验显示,TNF-α刺激NF-κB通路相关蛋白p-IKKα/β和IkB-α表达;荧光定量PCR显示,NF-κB通路阻断剂可消除TNF-α诱导的IL-9、IL-5和IL-13的表达.最后,荧光定量PCR显示,Th9淋巴细胞通过尾静脉注射入肺癌小鼠体内后,小鼠脾脏中IL-9、IL-5和IL-13的表达明显升高,免疫印迹显示小鼠肺癌组织中凋亡蛋白Bax/Bc12表达升高,免疫荧光染色发现细胞增殖减少.结论 TNF-α可以通过NF-κB信号通路增强Th9细胞分化增强肺癌细胞凋亡,抑制肺癌细胞增殖.
关键词：TNF-αNF-κBTh9细胞分化肺癌
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金：黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目(2019-KYYWF-1211)
论文发表日期：2022-03-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 228-233 )
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