辐照促进肿瘤细胞分泌cGAMP和NO增强Ⅰ型干扰素应答
丁锦秋1
曹李敏2
孙雨梦2
胡楠2
王丽2
张蓓3
肖晖2
1.266000,青岛大学基础医学院免疫学系;200031上海,中国科学院上海巴斯德研究所2.200031上海,中国科学院上海巴斯德研究所3.266000,青岛大学基础医学院免疫学系
摘要：目的 揭示辐照诱导环鸟苷酸-腺苷酸(cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate,cGAMP)和一氧化氮(nitric oxide,NO)调节抗肿瘤Ⅰ型干扰素表达的新机制.方法 RT-qPCR技术检测Ifnb、Cxcl10、Il6和Nos2基因的表达.免疫印迹技术检测cGAS-STING信号通路激活和诱导型一氧化氮合酶(nitric oxide synthase 2 inducible,iNOS)的蛋白表达;液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)和ELISA检测细胞内外cGAMP的含量.通过使用LRRC8 volume-regulated anion channel(LRRC8/VRAC)和iNOS抑制剂阻断cGAMP释放和NO产生.结果 辐照处理肿瘤细胞MC38后,显著诱导了 p-STING、p-TBK1和p-IRF3的表达;相应地,Ifnb、Cxcl10和Il6基因的表达也大幅度升高(P＜0.001);辐照处理Cgas或Sting基因敲除的MC38细胞后,Ifnb、Cxcl10和Il6基因的表达明显下降(P＜0.001).此外,辐照处理MC38细胞后,在胞外上清中可以检测到细胞释放出来的免疫调节分子cGAMP(P＜0.001)和NO(P＜0.01);DCPIB抑制LRRC8/VRAC导致cGAMP释放减少(P＜0.05),同时Ⅰ型干扰素应答降低(P＜0.001).辐照还可以诱导MC38细胞表达iNOS,用SMT抑制iNOS后,细胞NO产生减少(P＜0.05),Ⅰ型干扰素应答也降低(P＜0.05).结论 本文证实cGAS-STING信号通路在辐照诱导抗肿瘤的Ⅰ型干扰素应答中至关重要,并揭示肿瘤细胞通过外运或分泌具有免疫调节功能的小分子cGAMP和NO可以进一步放大Ⅰ型干扰素应答,因此发现了辐照诱导Ⅰ型干扰素表达的新机制.
关键词：放疗cGAMPNOⅠ型干扰素应答LRRC8/VRAC
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(32030040)
论文发表日期：2022-04-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 277-286 )
英文信息