miR-320a通过靶向调控NLRP3对氧糖剥夺诱导的大鼠心肌细胞损伤的保护作用
刘欢
马小峰
王广能
谭剑凯
421002衡阳,南华大学衡阳医学院附属南华医院心血管内科
摘要：目的 探讨miR-320a对氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制.方法 建立OGD诱导心肌H9C2细胞损伤模型,采用qRT-PCR法检测细胞中miR-320a和NLRP3 mRNA表达水平.双荧光素酶报告系统验证miR-320a与NLRP3的靶向关系.将miR-320a mimics及其阴性对照mimics-NC、NLRP3过表达质粒及其空载质粒分别或同时转染至H9C2细胞中,再进行OGD损伤诱导.采用CCK-8检测细胞增殖活性;比色法测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;ELISA检测细胞IL-1β和IL-18水平;Western blot检测细胞中 Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3、NLRP3、ASC 和caspase-1 蛋白表达水平.结果 OGD诱导的 H9C2细胞中 miR-320a表达水平明显降低,而NLRP3mRNA表达水平明显升高(P＜0.05).双荧光素酶报告系统验证,miR-320a靶向负调控NLRP3表达.miR-320a过表达可提高OGD暴露下H9C2细胞增殖活性,上调Bcl-2蛋白表达,降低LDH活性、细胞凋亡率、IL-1β和IL-18水平以及细胞中Bax、Cleaved-caspase-3、NLRP3、ASC和caspase-1等蛋白表达水平.然而,NLRP3过表达可逆转miR-320a过表达对OGD暴露下H9C2细胞损伤的改善作用.结论 miR-320a可通过靶向负调控NLRP3表达提高OGD暴露下心肌细胞的增殖活性,降低细胞凋亡和炎症水平,从而减轻OGD诱导的心肌细胞炎症损伤.
关键词：miR-320aNLRP3炎性小体氧糖剥夺心肌细胞
分类号：R34(基础医学)
资助基金：湖南省教育厅科学研究项目(20C1587)湖南省自然科学基金项目(2021JJ70045)湖南省卫生健康委重点资助课题(20201905)
论文发表日期：2023-02-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 102-110 )
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