柯里拉京抑制LPS和ATP激活的NLRP3炎症小体和巨噬细胞焦亡
罗甜裕1
周小艺2
秦敏燕2
张莹1
潘浩1
黄晓迪3
1.510006,广州中医药大学基础医学院人体解剖学系;510006,广州中医药大学基础医学院中西医结合基础研究中心2.510006,广州中医药大学基础医学院人体解剖学系3.510632广州,暨南大学生命科学技术学院免疫生物学系
摘要：目的 探讨柯里拉京对细菌脂多糖(LPS)联合腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的巨噬细胞内NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的调控作用和机制.方法 采用CCK8试剂检测不同浓度柯里拉京对J774A.1细胞活力的影响;碘化丙啶(PI)染色和乳酸脱氢酶(LDH)释放检测柯里拉京对LPS+ATP诱导的细胞死亡的影响.Western blot法检测细胞上清液中炎症小体活化标志物caspase-1 p20(Mr20 000)和成熟IL-1β(Mr17 000)的表达水平,以及检测细胞内NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β前体(pro-IL-1β)和焦亡执行蛋白GSDMD的表达.ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β的水平.活性氧(ROS)荧光探针H2DCFDA染色观察柯里拉京对ROS产生的影响.结果 柯里拉京浓度小于40μmol·L-1时对细胞活性影响较小.柯里拉京减少LPS+ATP刺激的细胞内PI阳性细胞的比例和LDH的释放.柯里拉京抑制LPS+ATP刺激的巨噬细胞内GSDMD蛋白N末端(GSDMD-NT)的表达,以及减少细胞释放caspase-1 p20和成熟IL-1β到培养上清.柯里拉京抑制细胞分泌炎症因子IL-1 β和减少ROS的产生.然而ROS的诱导剂鱼藤酮能拮抗柯里拉京抑制NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的作用.结论 柯里拉京抑制LPS+ATP诱导的巨噬细胞内NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡依赖于抗氧化作用.
关键词：柯里拉京巨噬细胞NLRP3炎症小体细胞焦亡抗氧化
分类号：R392.5(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(82004026)广东省基础与应用基础研究基金(2019A1515110613)广州市科技计划项目(202102020540)广东省中医药局科研项目(20221124)
论文发表日期：2023-04-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 296-304 )
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