N-乙酰半胱氨酸酰胺对脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症的保护作用及机制研究
张亮1
刘思佳1
刘鑫2
邱红梅1
杨婷1
时新惠1
钟佩伶1
袁烈1
伍俊豪3
李小丽1
1.400016,重庆医科大学药学院药理学系;400016,重庆医科大学药学院药物代谢研究重庆市重点实验室2.400038重庆,陆军军医大学西南医院临床医学研究中心3.400016,重庆医科大学药学院
摘要：目的 研究N-乙酰半胱氨酸酰胺(NACA)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症的保护作用及作用机制,为NACA治疗脓毒症提供理论依据.方法 CCK-8法检测NACA和N-乙酰半胱氨酸(NAC)对RAW264.7细胞活力的影响;采用ELISA检测NACA和NAC对LPS诱导的RAW264.7细胞上清中TNF-α和IL-6水平;qRT-PCR检测NACA对LPS诱导的RAW264.7 细胞中 TNF-α、IL-6、IL-1β、ATF4、CHOP 的 mRNA 表达的影响;Western blot 检测 NACA 对 LPS 诱导的 RAW264.7 细胞中TLR4/NF-κB及PERK/ATF4/CHOP信号通路中关键蛋白表达的影响.结果 0.1～5 mmol/L的NACA和NAC对RAW264.7细胞活力无明显的影响(P＞0.05).1 mmol/L和5 mmol/L的NACA和NAC可显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞上清中TNF-α和IL-6的水平(P＜0.01),且NACA的降低效果优于统计量的NAC.1 mmol/L和5 mmol/L的NACA也可显著降低LPS诱导的 RAW264.7 细胞中 TNF-α、IL-6、IL-1β、ATF4、CHOP mRNA 的表达(P＜0.05、P＜0.01).Western blot结果表明,1 mmol/L和5 mmol/L 的 NACA 可显著降低 TLR4、p-IκB、p-65、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、Bip 和 CHOP 蛋白的表达(P＜0.05、P＜0.01).结论 NACA可能通过TLR4/NF-κB及PERK/ATF4/CHOP信号通路抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞的炎症反应,为NACA治疗脓毒症的抗炎性药物筛选提供了实验依据.
关键词：脂多糖N-乙酰半胱氨酸酰胺脓毒症PERKTLR4
分类号：R967(药理学)
资助基金：国家自然科学基金(81873955)国家自然科学基金(82172133)重庆市自然科学基金(csct2020jcyj-msxmX0223)重庆市自然科学基金(csct2022nscq-msx0214)
论文发表日期：2023-06-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 487-492,506 )
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