基于Keap1-Nrf2/HO-1信号通路探讨miR-141对大鼠脑缺血再灌注后的炎症反应及保护神经元功能的研究
罗贤亮1
郭昌贵2
姚发元1
陈禹彤1
陈万琼1
付雨桐3
1.657000,昭通市中医医院神经内科;657000 昭通,云南省区域中医(脑病)诊疗中心2.657000,昭通市第一人民医院3.650101,昆明医科大学第二附属医院康复医学科
摘要：目的 探究miR-141靶向KELCH样ECH关联蛋白-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Keap1-Nrf2/HO-1)信号通路调控脑缺血再灌注(IR)后的炎症反应及保护神经元功能的作用机制.方法 60只大鼠随机分为sham组、IR组、agomir-NC组、miR-141组;agomir-NC组、miR-141组大鼠侧脑室注射agomir NC、miR-141 agomir,sham组、IR组注射等体积生理盐水.用大脑中动脉栓塞(MCAO)构建IR模型,sham组只插线不结扎.72 h后行神经功能学评分;TTC染色、TUNEL染色检测脑梗死体积和细胞凋亡;ELISA 法、qRT-PCR、Western blot检测 IL-1β、IL-6、TNF-α、miR-141、Keap1、Nrf2、HO-1、NLRP3 水平.同时将体外培养并转染的小胶质细胞BV-2分为control组、OGD组、agomir-NC组、miR-141组、miR-141+pcDNA3.1-NC组、miR-141+Keap 1组;糖氧剥夺(OGD)法建立IR细胞模型.TargetScanHuman预测及双荧光素酶报告验证miR-141对Keap1的靶向调控关系;MTT法、AnnexinV-FITC/PI双染法测定BV-2细胞增殖、凋亡能力;再次应用ELISA法、qRT-PCR、Western blot检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、TNF-α、miR-141、Keap1、Nrf2、HO-l、NLRP3水平.结果 过表达miR-141 可促进IR大鼠神经功能恢复,减少脑梗死体积和细胞凋亡,降低IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3水平,升高Nrf2、HO-1水平.BV-2细胞中miR-141能够负向调控Keap1表达,过表达miR-141抑制Keap1-Nrf2/HO-1信号通路,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,并下调IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3的表达.结论 miR-141能够靶向调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路,减轻IR的炎症反应,限制小胶质细胞激活,保护神经元.
关键词：miR-141脑缺血再灌注KELCH样ECH关联蛋白1-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1炎症反应神经元保护
分类号：R364(病理学)
资助基金：云南省康复临床医学中心(zx2019-04-02)
论文发表日期：2023-08-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 681-688 )
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