RNF20影响RNA病毒感染后的巨噬细胞极化
杨光
曹俊霞
张纪岩
董洁
100850 北京,军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所
摘要：目的 探究环指蛋白20(RNF20)在抗RNA病毒先天免疫中的作用.方法 在293T人胚肾上皮细胞中过表达RNF20,运用双荧光素酶报告基因实验,检测仙台病毒(SeV)感染诱导的干扰素a4(Ifna4)基因启动子活化.构建Rnj20基因髓系条件性敲除小鼠模型(Rnf20F/F;Lyz2-Cre),运用流式细胞术检测Rnf2OF/F;Lyz2-Cre 和对照Rnf20F/F小鼠骨髓、脾脏和外周血髓系细胞亚群的比例;利用建立的小鼠模型培养骨髓源巨噬细胞(BMDMs),在SeV和水疱性口炎病毒(VSV)感染后,运用免疫印迹检测转录因子干扰素调节因子3(IRF3)和核因子-κB(NF-κB)p65亚基的磷酸化,通过ELISA检测细胞因子IFN-β、TNF-α、IL-6的表达,通过高通量转录组测序分析转录组的改变,并通过LPS和IL-4分别诱导巨噬细胞M1和M2极化,证实RNF20对于转录组的影响.结果 293T细胞中RNF20过表达不影响SeV感染诱导的Ifna4基因启动子活化.Rnf2OF/F;Lyz2-Cre和Rnf20F/F小鼠髓系细胞发育无明显差异,在RNA病毒感染2组小鼠的BMDMs后,IRF3、NF-κB p65的磷酸化和IFN-β、TNF-α、IL-6的表达相似,但是一些与巨噬细胞极化相关的基因表达有显著差异.RNF20的缺失有抑制巨噬细胞M1型极化、促进巨噬细胞M2型极化的趋势.结论 RNF20不影响RNA病毒感染诱导的IRF3和NF-κB通路活化,但可通过影响巨噬细胞极化而参与感染后炎症的消退.
关键词：环指蛋白20骨髓源的巨噬细胞RNA病毒极化
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(82201945)国家自然科学基金(92169207)
论文发表日期：2024-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 11-18 )
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