TRIB3靶向AKT磷酸化调控高糖条件下小鼠RAW264.7巨噬细胞极化的机制研究
罗维1
周越2
王俐颖2
李显2
艾磊3
1.210014,南京体育学院运动健康学院2.100084,北京体育大学运动生理学教研室3.210033,江苏省体育科学研究所
摘要：目的 探讨TRIB3介导高糖条件下巨噬细胞促炎性M1型极化的下游机制.方法 以小鼠巨噬细胞RAW264.7为研究对象:1)细胞分为对照(CON)组和高糖(HG)组,Western blot检测TRIB3、p-AKT和AKT蛋白;在各组内分为DMSO组和SC79组/MK2206组,使用AKT激动剂SC79或抑制剂MK2206处理细胞,Western blot检测p-AKT和AKT蛋白.2)细胞随机分为Control vector-DMSO组、TRIB3 overexpress-DMSO组、Control vector-SC79组、TRIB3 overexpress-SC79组、Control vector-MK2206组和TRIB3 overexpress-MK2206组,CCK8检测细胞活性,相差显微镜观察细胞形态并采集图像,Western blot检测TRIB3、p-AKT、AKT、iNOS和Arg-1蛋白,ELISA检测细胞培养液中IL-1β和IL-10分泌.结果 1)与CON组相比,HG组TRIB3显著增加、p-AKT/AKT显著下降.HG-SC79组p-AKT/AKT显著高于HG-DMSO组且与CON-SC79组无显著差异;HG-MK2206组p-AKT/AKT显著低于HG-DMSO组.2)与对应的Control vector组相比,TRIB3 overexpress组TRIB3均显著增加、p-AKT/AKT均显著下降;与对应的DMSO组相比,SC79组p-AKT/AKT均显著增加、MK2206组p-AKT/AKT均显著下降.与Control vector-DMSO组相比,TRIB3 overexpress-DMSO组出现较多长梭形和不规则形细胞,iNOS和IL-1β显著增加,IL-10显著减少.与TRIB3 overexpress-DMSO组相比,TRIB3 overexpress-SC79组长梭形和不规则形细胞明显减少,iNSO和IL-1β显著下降,IL-10显著增加;TRIB3 overexpress-MK2206组长梭形和不规则形细胞进一步增加,Arg-1和IL-10显著下降,IL-1β显著增加.结论 高糖环境下巨噬细胞中激活的TRIB3蛋白通过靶向负调控AKT磷酸化水平发挥诱导巨噬细胞M1型极化、抑制M2型极化的促炎作用.
关键词：小鼠RAW264.7细胞巨噬细胞极化TRIB3蛋白AKT磷酸化高糖条件
分类号：R392.1(医学免疫学)R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)R364.5(病理学)
资助基金：国家自然科学基金(32200944)江苏高校青蓝工程资助项目(2023)江苏省体育科学研究所基金项目(BM2023-03)
论文发表日期：2024-02-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 138-144 )
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