结直肠癌类器官的反应性T细胞受体筛选及功能鉴定
梅瑶瑶1
王应明1
韩晓建1
申美莹2
李娅3
魏正强3
金艾顺1
1.400016,重庆医科大学基础医学院免疫学教研室;400016,肿瘤免疫调节与免疫干预重庆市重点实验室2.400016,重庆医科大学附属第一医院乳腺外科3.400016,重庆医科大学附属第一医院胃肠外科
摘要：目的 本研究通过建立基于结直肠癌(colorectal cancer,CRC)类器官模型以及CRC反应性肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte,TIL)扩增和分离,筛选肿瘤特异性T细胞受体(T cell receptor,TCR)并进行功能验证,为结直肠癌个体化过继性T细胞免疫治疗的临床转化提供技术平台和研究基础.方法 通过体外3D培养技术构建结肠癌患者组织来源的类器官模型,并利用HE染色和免疫组化进行形态学和特征分子表达检测.随后,将CRC类器官与TIL共培养,通过流式细胞技术分选反应性TIL,通过单个T细胞受体基因克隆技术分析反应性TCR克隆特征.进一步通过细胞毒性实验对TCR功能进行验证.结果 通过形态学、代表性分子(CK20和CDX2)表达水平验证了结直肠癌类器官与患者肿瘤具有高度相似性.成功筛选到CD 137表达上调和IFN-γ分泌增加的结直肠癌反应性T细胞,其中TCR2-T展现出较好的肿瘤反应性和体外肿瘤杀伤功能.结论 建立了基于CRC-Org的反应性TCR筛选和功能验证平台,为结直肠癌个体化T细胞治疗转化应用提供技术平台.
关键词：结直肠癌类器官肿瘤反应性T细胞T细胞受体抗肿瘤
分类号：R735.3(消化系肿瘤)R392(医学免疫学)
资助基金：重庆市自然科学基金博士后科学基金项目(cstc2020jcyi-bshX0020)
论文发表日期：2024-03-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 279-285 )
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