抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体的筛选、表达和鉴定
蒋丹1
舒纬童1
李光琪2
蓝华滔1
黄倩莹1
徐广贤1
1.523808 东莞,广东医科大学医学技术学院附属东莞第一医院东莞市分子免疫与细胞治疗重点实验室2.750000 银川,宁夏医科大学总医院医学实验中心
摘要:目的 筛选特异性抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体序列,表达纯化重组抗SARS-CoV-2纳米抗体,评估其特性及应用潜能.方法 基于前期构建的天然噬菌体纳米抗体展示库,以生物素化SARS-CoV-2 S蛋白受体结合结构域抗原为靶点,利用生物素-链霉亲和素液相筛选法、噬菌体-ELISA和测序筛选抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体序列;构建重组抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体表达载体,IPTG诱导表达并纯化,采用SDS-PAGE、Western blot和ELISA分析其特征及应用潜能.结果 成功获得2条抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体序列,并构建了相应原核表达菌;成功表达纯化重组抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体,其与SARS-CoV-2 S蛋白可特异性结合.结论 筛选及表达的重组抗SARS-CoV-2 S蛋白纳米抗体为其应用于SARS-CoV-2检测和治疗及相关研究提供基础.
关键词:纳米抗体新型冠状病毒(SARS-CoV-2)S蛋白纯化表达
分类号:Q939.48(微生物分类学(系统微生物学))R392-33(医学免疫学)
资助基金:广东医科大学高层次人才科研资助计划(4SG23190G)广东医科大学博士科研启动基金项目(GDMU2022030)宁夏回族自治区重点研发计划(2022CMG03123)
论文发表日期:2024-03-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 309-314 )
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