黄芪甲苷对炎性巨噬细胞RAW264.7的免疫调控及其机制探讨
刘柯1
贾淑红2
丁军颖1
1.100010,首都医科大学附属北京中医医院北京市中医药研究所中医感染性疾病基础研究北京市重点实验室2.100010,首都医科大学附属北京中医医院北京市中医药研究所老年病科
摘要：目的 基于网络药理学和体外实验,在巨噬细胞RAW264.7上,以其免疫调变规律探究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)防治肺炎的可能机制.方法 以Pharm Mapper、SwissTargetPrediction和STITCH数据库预测AS-Ⅳ的作用靶点,通过Genecards、DisGeNET数据库检索肺炎靶点,并获取与AS-Ⅳ作用靶点的交集;再借助STRING平台和Cytoscape软件构建交集靶点的蛋白相互作用网络,并依据degree值筛选核心靶点;利用DAVID数据库进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,并进一步运用KEGG数据库预测AS-Ⅳ干预肺炎的可能通路.最后,据此进行体外实验:将对数生长期的巨噬细胞RAW264.7随机分成3组:对照组(C)、模型组(M)及AS-Ⅳ实验组(AS-Ⅳ).除C组外,其他2组均以LPS刺激,AS-Ⅳ组再加以AS-Ⅳ干预.CCK8法明确AS-Ⅳ对其增殖的影响;ELISA法确定各组NF-κB、IL-1β、MCP-1及Arg-1的分泌水平;以qPCR确证各组TLR4及其下游通路分子HMGB1和TLR4等的基因表达.结果 网络药理学分析显示,AS-Ⅳ有158个预测作用靶点,与肺炎交集靶点有112个.KEGG通路富集分析得到126条作用通路,结合文献确定HMGB1、TLR4、TRIF、Myd88及NF-κB为待验证通路靶点.进一步体外实验证实,AS-Ⅳ组NF-κB、IL-1β及MCP-1较M组显著降低,Arg-1则明显升高,但HMGB1、TLR4、TRIF及Myd88基因表达较M组显著减少,差异均有统计学意义.结论 AS-Ⅳ可通过HMGB1/TLR4相关信号通路调控RAW264.7的炎性免疫应答,这为临床肺炎的治疗提供了实验基础及数据支持.
关键词：黄芪甲苷炎性巨噬细胞免疫调控HMGB1TLR4
分类号：R285.5(中药学)
资助基金：北京市首批高层次公共卫生技术人才建设项目(2022-3-009)
论文发表日期：2024-07-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 555-560 )
英文信息