丹皮酚对子宫内膜异位症小鼠NLRP3炎性小体活化及炎症水平的影响
杜秀芳1
杨宏洁2
康晓蓓1
付昌娜3
杨涛4
1.050000,石家庄市妇幼保健院妇女群体保健科2.050000,石家庄市妇幼保健院保健部3.050000,石家庄市妇幼保健院采血室4.050000,石家庄市妇幼保健院产二科
摘要：目的 探讨丹皮酚对子宫内膜异位症(EMS)小鼠病灶组织和小鼠子宫内膜上皮细胞(mEECs)核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)信号通路和焦亡水平的影响.方法 采用异体移植法建立EMS小鼠模型,将35只Balb/c小鼠分为假手术组、模型组、12.5 mg/kg 丹皮酚组、25 mg/kg 丹皮酚组、50 mg/kg 丹皮酚组、0.5 mg/kg孕三烯酮组(阳性药组)和50 mg/kg 丹皮酚+Nrf2抑制剂ML385(30 mg/kg)组,每组5只.mEECs设为细胞对照组、10 ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)或100 ng/ml脂多糖(LPS)模型组、50 μmol/L丹皮酚组、100 μmol/L 丹皮酚组和100 μmol/L丹皮酚+ML385组.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测EMS小鼠血清和mEECs培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-1β和IL-18水平.苏木精-伊红(H&E)染色检测小鼠异位病灶组织病理变化.Western blot实验检测异位病灶组织和mEECs中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、消皮素D蛋白N端片段(GSDMD-N)、Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白表达水平.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测mEECs细胞存活率,EdU染色法检测mEECs细胞增殖能力;划痕实验与Tranwell小室分别检测mEECs迁移与侵袭能力;FAM-FLICA® Caspase-1试剂盒检测mEECs中Caspase-1水平.使用AutoDock Vina软件对丹皮酚与Nrf2进行分子对接,评价两者结合能力.结果 与模型组相比,丹皮酚组和孕三烯酮组EMS小鼠异位病灶体积减小(P<0.05),血清TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18水平降低,异位病灶组织中焦亡标志蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1和GSDMD-N表达降低,Nrf2、HO-1和NQO-1表达水平升高.与TGF-β1模型组相比,丹皮酚组mEECs增殖、迁移和侵袭能力降低.与LPS模型组相比,丹皮酚组mEECs炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18水平降低,NLRP3、ASC、Caspase-1和GSDMD-N表达水平降低,Nrf2、HO-1和NQO-1表达水平升高.在EMS小鼠模型中,Nrf2抑制剂ML385能逆转50 mg/kg丹皮酚对异位病灶组织焦亡和炎性水平的抑制作用.在体外细胞模型中,ML358能逆转100 μmol/L丹皮酚对mEECs的作用.丹皮酚与Nrf2的结合打分结果为-6.1 kcal/mol,丹皮酚与Nrf2的VAL-604和LEU-365氨基酸残基有氢键结合.结论 丹皮酚可减轻EMS小鼠炎性反应,降低异位病症组织NLRP3炎性小体活化及焦亡水平,激活EMS小鼠异位病症组织中Nrf2/HO-1信号通路.
关键词：丹皮酚子宫内膜异位症NLRP3焦亡炎症Nrf2
分类号：R711.71(妇科学)
资助基金：石家庄市重点研发计划项目(221460493)
论文发表日期：2024-08-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 646-654 )
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