GLPK通过H3K23琥珀酰化依赖的线粒体稳态介导RAW264.7巨噬细胞炎症反应
刘宇翔
梅健
朱祥瑞
欧琅琳
庞祥明
孟子童
唐瑜璟
沈傲
文诗晴
马翠
163319,哈尔滨医科大学大庆校区医学检验与技术学院免疫教研室
摘要：目的 探讨甘油激酶(GLPK)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠Raw264.7巨噬细胞炎症反应的调控作用.方法 体外培养Raw264.7巨噬细胞,构建LPS诱导的细胞炎症模型.利用RT-qPCR技术检测细胞炎症因子NF-κB、TNF-α、IL-6和IL-1β的转录水平;Western blot、免疫荧光检测GLPK表达与定位;Western blot检测细胞泛琥珀酰修饰与H3K23su的表达水平;染色质免疫沉淀定量PCR(ChIP-qPCR)检测H3K23su表达在抑炎因子IL-10启动子的富集水平;使用DCFH-DA探针检测细胞总活性氧(ROS)生成情况、Mito-SOX探针检测线粒体ROS水平、通过JC-1线粒体膜电位荧光探针检测线粒膜电位变化反映线粒体功能异常情况;采用GLPK过表达质粒转染细胞以检测GLPK对炎症反应、线粒体功能及琥珀酰化修饰的影响.结果 LPS诱导的Raw264.7细胞发生线粒体功能异常、炎症反应加剧、琥珀酰化修饰减少与GLPK蛋白表达下降.LPS处理组给予过表达GLPK后可以改善线粒体功能,减少炎症因子的转录水平.ChIP-qPCR结果显示,过表达GLPK能够逆转LPS抑制的IL-10启动子H3K23su修饰,抑制细胞的炎症反应.结论 LPS通过GLPK依赖的H3K23琥珀酰化修饰介导小鼠Raw264.7巨噬细胞的炎症反应.
关键词：甘油激酶线粒体稳态琥珀酰化修饰Raw264.7巨噬细胞炎症反应
分类号：R392.1(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(82170059)黑龙江省自然科学基金项目(ZD2023H003)
论文发表日期：2024-09-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 687-693 )
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