基于NLRP3炎性小体探究N-乙酰半胱氨酸对酒精性肝病大鼠肝脏炎性反应及焦亡的作用
朱晓静1
汤海林2
周梁3
1.215101,苏州市中西医结合医院药剂科2.215101,苏州市中西医结合医院肝病科3.215009,南京中医药大学附属苏州市中医医院中心实验室;215009,苏州市吴门医派研究院中心实验室
摘要：目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对酒精性肝病(ALD)大鼠肝脏炎性反应、焦亡水平及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响.方法 将雄性SD大鼠分为正常组、ALD模型组、100 mg·kg-1 NAC 组和200 mg·kg-1 NAC组.苏木精-伊红染色法(H&E)观察肝脏病理变化;原位末端标记法(TUNEL)检测肝组织细胞凋亡率.生化试剂盒测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和甘油三酯(TG)水平.大鼠正常肝细胞BRL-3A分为对照组、200 mmol/L酒精组(模型组)、2 mmol/L NAC组和5 mmol/LNAC组.MTT法检测细胞存活率;Western blot检测活化半胱氨酸蛋白酶-1(Cleaved-Caspase-1)、焦亡相关斑点样蛋白(ASC)、焦孔素蛋白N端(GSDMD-N)和NLRP3蛋白表达水平;总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒和丙二醛(MDA)试剂盒测定SOD和MDA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素1β(IL-1β)和IL-18水平;荧光酶标仪测定肝组织中N-乙酰半胱氨酸(ROS)水平;免疫荧光染色法测定BRL-3A细胞中ROS水平.结果 与正常组相比,模型组大鼠肝脏弥漫大量脂肪变性,血清ALT、AST和TG水平,肝脏组织中IL-1β和IL-18水平,ROS和MDA水平,Cleaved-Caspase-1、ASC、GSDM-N和NLRP3蛋白表达水平均升高,SOD水平降低(P<0.05).与模型组相比,NAC组肝组织脂肪变性程度减轻,肝脏中焦亡蛋白表达水平、IL-1β和IL-18水平,ROS和MDA水平均降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05).与对照组相比,模型组BRL-3A细胞上清液中IL-1β和IL-18水平,细胞中ROS和MDA水平,焦亡蛋白表达水平均升高(P<0.05),SOD水平降低(P<0.05).与模型组相比,NAC组BRL-3A细胞上述指标被逆转.结论 NAC降低ALD大鼠肝组织炎性反应以及焦亡水平,其机制可能为阻断NLRP3炎性小体信号通路.
关键词：酒精性肝病N-乙酰半胱氨酸肝细胞焦亡NLRP3活性氧
分类号：R575.1(消化系及腹部疾病)
资助基金：苏州市基础研究计划(SKYD2023075)姑苏卫生人才计划人才科研项目(GSWS2023062)吴中区科技计划(wzyw2023010)
论文发表日期：2024-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 803-811 )
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