FoxO3a影响过敏性鼻炎中巨噬细胞M2型极化及铁死亡水平
黎庆辉
曾永亮
陈雪梅
肖斌
易述军
402260,重庆大学附属江津医院耳鼻咽喉头颈外科
摘要：目的 探讨叉头盒蛋白O3a(FoxO3a)对过敏性鼻炎(AR)中巨噬细胞M2型极化及铁死亡的影响.方法 采集30例AR患者以及30位健康志愿者鼻腔灌洗液,收集3例AR患者以及3位健康志愿者的鼻黏膜.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鼻腔灌洗液中FoxO3a水平.M0型巨噬细胞分别转染siRNA阴性对照质粒(si-Con)、siRNA FoxO3a质粒(si-FoxO3a)、pcDNA3.1-vector或pcDNA3.1-FoxO3a质粒后,用白介素-4(IL-4)诱导向M2型极化.M0型巨噬细胞设为对照组、IL-4模型组、IL-4+si-Con组、IL-4+si-FoxO3a组、IL-4+si-FoxO3a+核转录因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂ML385组、IL-4+pcDNA3.1-vector组和IL-4+pcDNA3.1-FoxO3a组.建立M0型巨噬细胞与人鼻黏膜上皮细胞(NECs)共培养体系,分为NECs+M0型巨噬细胞(对照组)、NECs+M2型巨噬细胞(IL-4模型组)、NECs+si-FoxO3a转染巨噬细胞(IL-4+si-FoxO3a组)、NECs+si-FoxO3a转染巨噬细胞+ML385(IL-4+si-FoxO3a+ML385组),流式细胞仪检测NECs凋亡.C57BL/6小鼠分为正常组、AR模型组和shRNA-FoxO3a腺相关病毒(AAV-sh-FoxO3a)组,HE染色考察鼻黏膜组织病理变化,流式细胞仪检测小鼠鼻腔灌洗液中巨噬细胞M2型比例.ELISA检测小鼠鼻腔灌洗液IL-5、IL-13及NECs粘蛋白5AC(MUC5AC)水平.Western blot检测FoxO3a、IL-10、精氨酸酶1(Arg-1)、Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白水平.结果 与正常组对比,FoxO3a在AR患者鼻腔灌洗液和鼻黏膜组织中表达升高.与对照组相比,IL-4模型组M2型巨噬细胞比例、FoxO3a表达水平升高,Nrf-2、HO-1和GPX4蛋白表达水平降低,Fe2+和丙二醛(MDA)水平升高(P<0.05).与IL-4模型组相比,IL-4+si-FoxO3a组上述指标被逆转.与IL-4模型组相比,IL-4+pcDNA3.1-FoxO3a组M2型巨噬细胞比例增加.在共培养体系中,与IL-4模型组相比,IL-4+si-FoxO3a组NECs凋亡及MUC5AC分泌减少(P<0.05).ML385逆转si-FoxO3a对NECs的保护效应.与模型组相比,AAV-sh-FoxO3a组小鼠鼻黏膜组织损伤减轻,鼻腔灌洗液中IL-5、IL-13水平,M2型巨噬细胞比例及FoxO3a水平降低,GPX4、Nrf2和HO-1表达升高.结论 干扰FoxO3a表达可抑制巨噬细胞铁死亡,抑制M2型极化,降低NECs损伤,其机制与激活巨噬细胞Nrf-2/HO-1信号通路有关.
关键词：过敏性鼻炎M2巨噬细胞FoxO3a铁死亡凋亡
分类号：R765.21(鼻科学、鼻疾病)R364.5(病理学)
资助基金：重庆市科卫联合医学科研项目(2020FYYX097)重庆市江津区科技局基金(Y2021055)
论文发表日期：2024-11-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 831-838 )
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