人骨形态发生蛋白-7全长基因cDNA的克隆和序列分析
李新友1
刘淼1
李曙明1
姚煜1
王全颖2
杨广笑2
1.西安交通大学第一医院骨科,西安,7100612.西安华广生物工程公司,西安,710075,中国
摘要：目的:克隆人骨形态发生蛋白-7(BMP-7)全长基因,并进行测序及序列分析,研究其结构和功能.方法:采用异硫氰酸胍一步法从人胎儿肾中提取总RNA,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,分段扩增出hBMP-7全长基因cDNA,与PGEM-T easy连接成PGEM-T easy/hBMP-7重组质粒,采用Sanger双脱氧链终止法测定基因序列.结果:以4号特异引物引导的RT-PCR扩增出BMP-7基因3'端540 bp片段,以2号特异引物引导的RT-PCR扩增出BMP-7基因5'端750 bp片段,重组连接两片段得到BMP-7全长基因cDNA.与Genebank上发表的hBMP-7序列(XM30619)比较有一个碱基不同,第862位核苷酸由T→G,编码的氨基酸由苯丙氨酸变为缬氨酸.结论:首次从中国人胎肾中分段克隆出BMP-7全基因cDNA,该基因在骨关节系统的损伤与修复中具有重要的临床应用价值.
关键词：骨形态发生蛋白-7基因克隆序列分析
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2003-03-02
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 62-66 )
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